Realtids PCR-reagenser og -sæt
Produkter designet til brug under realtids (kvantitative) PCR-procedurer. Inkluderer masterblandinger, DNA-polymeraser, reverse transkriptaser, størrelsesstandarder, kits og reagenser.
Revers transkriptionspolymerasekædereaktion (RT-PCR) er en laboratorieteknik, der kombinerer revers transkription af RNA til DNA og den efterfølgende amplifikation af DNA'et ved hjælp af PCR.
I RT-PCR omdanner et revers transkriptaseenzym en RNA-skabelon til dens komplementære DNA (cDNA). cDNA'et bliver derefter skabelonen for PCR-amplifikation.
Et typisk RT-PCR-kit indeholder de vigtigste komponenter, der er nødvendige for analysen:
- Buffer Primere– en kombination af deoxynukleotidtriphosphater (dNTP'er) af de fire baser adenin (dATP), cytosin (dCTP), guanin (dGTP) og thymin (dTTP)
- Revers transkriptase-
reagens Kombinationen af RT-PCR- og qPCR-teknikker (nogle gange mærket RT-qPCR) bruges ofte i forskning og kliniske laboratorier til at analysere genekspression og kvantificere viralt RNA. Da denne metode bruger fluorescens til at spore amplifikationsreaktionen, kan disse kits også omfatte:
- Fluorogene primere eller mærkede
- fluorogene prober
Fluorescerende farvestofreagenser til cDNA PCR kan købes separat eller som cDNA-syntesesæt.
RT-PCR bruges almindeligvis til RNA-detektion, molekylær kloning og gensekventering. RT-qPCR bruges til genekspressionsanalyse, RNAi eller microarray-validering, patogendetektion, genetisk testning og anden sygdomsforskning.