Nukleinsyremærkning og detektion
Nukleinsyremærkning og detektionsprodukter bruges til at tilføje tags eller mærker til nukleinsyrer for at muliggøre detektion eller oprensning. De mærkede nukleinsyrer omtales som 'prober.'
Nukleotidmærkning kan omfatte radioaktive fosfater, biotin, fluoroforer og forskellige enzymer. Biokonjugationsmetoder, der producerer nukleinsyreprober, kan også tilpasses til at binde dem til andre molekyler (til målrettet levering) og overflader (for at lette immobilisering).
Selvom nukleinsyreprober kan mærkes under syntese, kan brugerdefinerede oligonukleotidprober være dyre, så mange forskere vælger at mærke deres egne.
Hurtig og effektiv benchtop-oligonukleotidmærkning kan udføres til fremstilling af mindre probemængder, eller når der er behov for flere prober med det samme mærke. Enzymatiske metoder er overkommelige til probegenerering i lille skala; kemiske metoder er mere velegnede til reaktioner i større skala.
Prober kan mærkes i hver ende af oligonukleotidet eller tilfældigt inkorporeret gennem sekvensen. Valget af metode afhænger af graden af mærkning, der kræves, og om ændringer vil forhindre de forventede interaktioner. Nukleinsyrehybridiseringsreaktioner kan drage fordel af tilfældig mærkeinkorporering; proteininteraktioner kan kræve slutmærkning.
Opsummering af metoder
Enzymatisk
- TdT: ssDNA
- T4 RNA Ligase: ssDNA, RNA
- T4 PNK: ssDNA, RNA
- DNA-polymerase: DNA, RNA
- RNA-polymerase: RNA
Kemi
- Periodat: RNA
- EDC: DNA, RNA
- Uspecifikke tværbindere: DNA, RNA
Detektionsmetoder er biotinbaserede, kemiluminescerende, fluorescerende, radioaktive eller kombinationen af flere teknikker. Test kan omfatte nukleinsyretest til patogendetektion og fluorescerende in situ hybridisering (FISH) for specifikke DNA-sekvenser i kromosomer.
Invitrogen™ Quant-iT™ dsDNA-analysesæt, høj følsomhed (HS) og bredt område (BR)
Til meget selektiv kvantificering af dobbeltstrenget DNA over RNA producerer Quant-iT dsDNA Assay Kits, høj følsomhed og bred rækkevidde, fluorescenssignaler, der er lineære i intervallerne på henholdsvis 0,2-100 ng og 2-1000 ng DNA.
Invitrogen™ Qubit™ RNA High Sensitivity (HS), Broad Range (BR) og Extended Range (XR) analysesæt
Kits muliggør hurtig og følsom påvisning af RNA med lav og høj abundance og kan skelne mellem RNA og DNA, protein og frie nukleotider.
Invitrogen™ Qubit™ 1X dsDNA High Sensitivity (HS) og Broad Range (BR) analysesæt
Meget selektiv for dsDNA over RNA, den Qubit 1X dsDNA HS og BR Assay Kits tilbyder letanvendelige formuleringer til nøjagtig kvantificering af dsDNA i 100 og 500 analyseformater. Lambdastandarder giver tilstrækkeligt materiale til op til 500 prøver.
Invitrogen™ Qubit™ dsDNA kvantificeringsanalysesæt
Opnå nøjagtig og præcis kvantificering af dobbeltstrenget DNA med Qubit dsDNA HS- og BR-analysesæt. Disse dsDNA-kvantificeringssæt muliggør hurtig og selektiv påvisning af DNA-prøver med lav og høj overflod og kan skelne dsDNA fra ssDNA, RNA, protein og frie nukleotider.
Invitrogen™ Quant-iT™ 1X dsDNA-analysesæt, høj følsomhed (HS) og bredt område (BR)
For nem og nøjagtig dsDNA-kvantificering muliggør Quant-iT 1X dsDNA HS- og BR-assays op til 1.000 fluorescensbaserede analyser i et 96-brønds mikropladeformat.
Molecular Probes™ FISH Tag™ DNA Kits with Alexa Fluor™ Dyes
FISH Tag DNA kits provide a complete solution for fluorescence in situ hybridization (FISH) applications. Choose from kits using Alexa Fluor 488, Alexa Fluor 555, Alexa Fluor 594, Alexa Fluor 647, or multicolor dyes for probe synthesis, purification, and labeling of specimens for imaging.
TaqMan® TaqMan™ Ikke-kodende RNA-assay
Invitrogen™ Qubit™ ssDNA Assay Kit
Kvantificer oligonukleotider eller langt ssDNA nemt og hurtigt med Qubit ssDNA Assay Kit, som fungerer med Qubit Fluorometer og andre fluorometre eller pladelæsere. Almindelige forurenende stoffer såsom salte, opløsningsmidler, detergenter og protein tolereres godt med denne analyse.
Thermo Scientific™ Kemiluminescerende nukleinsyredetektionsmodulsæt
Detekter biotin-mærkede nukleinsyreprober i forskellige membranblotting-applikationer med dette komplette kemiluminescerende detektionssystem.
Invitrogen™ ViewRNA™ Cell Plus Assay Kit
De ViewRNA Cell Plus Assay er et nyt assay, der kombinerer immuncytokemi med ViewRNA teknologi, en proprietær fluorescerende in situ hybridisering og sekventiel forgrenet DNA-amplifikationsteknik, til at visualisere både RNA med enkeltmolekylefølsomhed og protein i individuelle celler.
Invitrogen™ BioPrime™ DNA-mærkningssystem
Specielt designet til brug ved fremstilling af biotinylerede prober
Thermo Scientific™ ViewRNA Fluorescenssæt for vævsanalyse
ViewRNA Vævsassays er RNA in situ hybridiseringsassays (ISH) til pålidelig påvisning af op til fire RNA-mål inden for vævssektioner og dyrkede celler. Visualiser ethvert RNA i ethvert væv/celle med enkeltkopifølsomhed.
Invitrogen™ PrimeFlow™ RNA-analysesæt
Et in situ hybridiseringsassay, der kombinerer kraften i forgrenet DNA-teknologi med enkeltcelleopløsningen af flowcytometri, hvilket muliggør påvisning af fire RNA-mål i kombination med immunfænotyping for celleoverflade og intracellulære proteiner ved hjælp af fluorochrom-konjugerede antistoffer.
Invitrogen™ Qubit™ RNA IQ-analysesæt
Få brugsklar påvisning af RNA-nedbrydningsoplysninger med Qubit RNA integritet og kvalitet (IQ) Assay Kit og standarder, som indeholder to unikke farvestoffer til binding af stort og/eller højt struktureret RNA og lille, nedbrudt RNA. Tilsammen muliggør disse farvestoffer påvisning af RNA-kvalitet og integritet.
Invitrogen™ Qubit og Quant-it Assay Kit-standarder
Opnå præcis kvantificering af dsDNA- eller RNA-prøver med stand-alone Qubit nukleinsyrestandarder.