Thermo Scientific™ LightShift™ Poly (dI-dC)

Sættet indeholder reagenser til opsætning og tilpasning af protein:DNA-bindingsreaktioner, et kontrolsæt af DNA og proteinekstrakt til at teste kitsystemet, stabiliseret streptavidin-HRP-konjugat til probe for det biotin-mærkede DNA-mål og et usædvanligt følsomt kemiluminescerende substratmodul til påvisning. LightShift™ EMSA-detektion ligner en Western blot. Biotin-ende-mærket dupleks-DNA inkuberes med en nuklear ekstrakt eller oprenset faktor og elektroforeres på en naturlig gel. DNA'et overføres derefter hurtigt (30 minutter) til en positiv nylonmembran, UV-tværbundet, probes med streptavidin-HRP-konjugat og inkuberes med substratet. Protokollen fra mærkning til resultater kan udføres på en enkelt dag. Alt hvad du behøver for at udføre analysen er oprenset DNA-mål, der er blevet endemærket med biotin, det proteinekstrakt du ønsker at teste, nylonmembran og grundlæggende elektroforeseudstyr. DNA-mål kan syntetiseres med 5'- eller 3'-biotinmærker, eller de kan mærkes efter syntese ved hjælp af Thermo Scientific Biotin 3'-ende DNA-mærkningskit (del nr. 89818). Nukleare, cytosoliske eller helcelleproteinekstrakter kan opnås ved en række forskellige metoder, herunder Thermo Scientific NE-PER Nuklear og cytoplasmatisk ekstraktionsreagenssæt (delnr. 78833).

Højdepunkter:

• Inkluderer EBNA-kontrolsystem til at hjælpe nye brugere med at udvikle et fungerende assay og forstå de metoder, der bruges til at bekræfte bindingsinteraktionsspecificitet
• Fremragende til påvisning af proteiner med lav overflod i nukleare ekstrakter
• Følsomhed, der overgår radioaktive og digoxigenin-metoder
• Kompatibel med tidligere etablerede bindingsbetingelser for populære DNA:protein-interaktioner