Invitrogen™ ZOOM™ Urinstof

De ZOOM™ IEF Fractionator tilbyder en hurtig, pålidelig metode til at reducere prøvekompleksiteten, berige proteiner med lav overflod og øge det dynamiske detektionsområde. Løsningsfase isoelektrisk fokusering med ZOOM™ IEF Fractionator giver reproducerbare separationer på tre timer. Fraktionerede prøver er klar til yderligere analyse ved todimensionel gelelektroforese (2DE), endimensionel gelelektroforese (1DE) eller todimensionel væskekromatografi/massespektrometri (2D LC/MS).

De ZOOM™ IEF Fractionator System (Figur 1) består af følgende komponenter:

• ZOOM™ IEF Fractionator er bygget til sikkerhed, pålidelighed og holdbarhed. Det inkluderer prøvekamre, der er nemme at samle, indbyggede bufferkamre, buffertrug, aftagelig elektrodesamling og sikkerhedslåg.
• ZOOM™ Diske er præstøbte polyacrylamidgeler, der eliminerer behovet for manuel forberedelse og minimerer enhver chance for krydskontaminering. Disse immobiliserede bufferdiske er præ-mærkede, til engangsbrug og designet til engangsbrug, hvilket sikrer ensartet og reproducerbar fraktionering. De opløser prøver i så mange som 7 fraktioner (ved hjælp af 8 skiver med specifik pH) til seks fraktioner (ved hjælp af seks skiver med specifik pH) fra pH 3-12. Du skal blot placere hver skive mellem prøvekamrene i ZOOM™ IEF Fractionator til at tillade separation i et specifikt pH-område.
• ZOOM™ Reagenser er reagenser af proteomisk kvalitet, herunder ZOOM™ 2D Protein Solubilizers urinstof, thiourinstof, CHAPS og amfolytter, der sikrer optimale betingelser for prøveforberedelse.
• Basic Protein Kit som inkluderer ZOOM™ Diske og ZOOM Strips til IEF af basisproteiner, fokuseringsbuffere og solubiliseringssæt.

Opsætningsprocedure for prøvekammer og fraktioneringsenhed

Figur 4-6 illustrerer samling af prøvekamrene og fraktioneringsenheden. Prøvekammeret og komponenterne passer nemt sammen og tilbyder en lækagesikker forsegling. Du skal blot placere skiver mellem prøvekamrene i ZOOM™ IEF Fractionator til at tillade separation i et specifikt pH-område. Hvis du f.eks. ønsker at fraktionere proteiner mellem pH 4,6 og 5,4, skal du flankere et prøvekammer med en ZOOM (r) Skive med pH 4,6 og en med pH 5,4.

Nedstrømsbehandling ved 2D gelelektroforese

Efter fraktionering kan de adskilte prøver udsættes for yderligere analyse ved brug af et smalt eller bredt område ZOOM™ Strimler på ZOOM™ IPGRunner™ System. Følg op med anden dimensionsanalyse ved hjælp af neutral pH NuPAGE™ ZOOM™ Geler.