Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit, uden kompetente celler

Indeholder Zero Blunt TOPO vektor indeholdende ccd B-genet til positiv selektion, der kun tillader vækst af plasmidvektorer med rekombinanter. Resistent over for Kanamycin (KanR) og Zeocin™ (ZeoR).
pCRBlunt II-TOPO vektor: designet til korrekturlæsning af
polymeraser pCRBlunt II-TOPO vektor er designet til at klone stumpendede PCR-produkter genereret af termostabile korrekturlæsepolymeraser som f.eks. Platinum™Pfx DNA polymerase. pCRBlunt II-TOPO vektor indeholder:

• EcoRI-steder, der flankerer PCR-produktets indsættelsessted for nem udskæring af indsættelser
• Kanamycin og Zeocin resistensgener til dit valg af selektion i E. coli
• SP6-promotor/primersted til in vitro RNA-transkription og sekventering
• M13 fremadgående og omvendte primersteder til sekventering eller PCR-screening

pCRBlunt II-TOPO klonselektion pCRBlunt
II-TOPO giver mulighed for direkte selektion af rekombinanter via afbrydelse af det dødelige E. coli -gen, ccd B. Vektoren indeholder ccd B-genet fusioneret til C-terminalen af LacZα fragment. Ligering af et stumpende PCR-produkt forstyrrer ekspression af LacZα - ccd B-genfusion, der kun tillader vækst af positive rekombinanter efter transformation. Celler, der indeholder ikke-rekombinant vektor, dræbes ved udpladning. Derfor er blå/hvid screening ikke påkrævet.
Forenklet TOPO-baseret kloning
ved hjælp af TOPO kloningsteknologi, er der ikke behov for PCR-primere indeholdende specifikke sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpræparation eller andre tidskrævende DNA-manipulationstrin. Bare tilføj din PCR-reaktion direkte til den medfølgende topoisomerase-ladede vektor, inkuber 5 minutter og transformer E. coli -kompetente celler.
Effektiv kloning Med
op til 95 % af klonerne, der bærer den ønskede indsats, kan du screene færre kloner, hvilket sparer dig tid og penge. pCRBlunt II-TOPO vektor, der bruges i dette sæt, leveres med dødeligt ccd B-gen til effektiv udvælgelse af stumpendede PCR-rekombinante produkter genereret af termostabile korrekturlæsningspolymeraser.
Standarden inden for kloning
Når det kommer til kloning, TOPO™ kloningsteknologi har været en pålidelig partner for tusindvis af videnskabsmænd i over ti år. Hurtig, nem at bruge og effektiv, TOPO™ kloning er blevet anvendt på mange forskellige vektorer til en bred vifte af anvendelser.
Zero Blunt TOPO PCR Cloning Kit
muligheder Zero Blunt TOPO PCR-kloningskit til direkte indsættelse af stumpendede PCR-produkter i en plasmidvektor kan købes med en række kompetente celler, der giver forskellige fordele afhængigt af dine behov Generel kloning:
TOP10 celler (kat. nr. K2800-20, K2800-40)
Højeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat. nr. K2860-01, K2860-40)
Generel kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R (kat. nr. K2820-20, K2820-40)
Hurtig vækst: Mach1™ -T1R Kemisk Kompetent E. Coli (Kat. Nr. K2830-20)
Giv din egen: for fleksibilitet og for at spare penge (kat. nr. 450254)
En version af sættet, der indeholder en PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (Kat. nr. K2800-02) til brug i isolering af rent, sekventeringsklar, rekombinant plasmid er også tilgængeligt.

• Hurtigt og nemt: gå fra PCR til kloner på kun tre trin og på så lidt som 5 minutter hands-on tid
• Effektiv: opnå op til 95% kloner med korrekt indsættelse
• Bevist: pålidelig ydeevne i over et årti med over 4.000 citater
• Simpelt: ingen ligase, post-PCR procedurer eller PCR-primere indeholdende specifikke sekvenser er påkrævet
• Vektor: pCR ™Blunt II-TOPO vektor: indeholder ccd B-genet, hvilket muliggør direkte selektion af rekombinanter
• Kloningsmetode: TOPO kloning: Topoisomerase –I-baseret, 5-minutters ligering af stumpendede PCR-produkter amplificeret med korrekturlæsende termostabile polymeraser
• Kompetente celler: Forskellige muligheder: vælg mellem sæt med enten generelle, højeffektive, bakteriofag T1-resistente, hurtigtvoksende kompetente celler (fås separat) eller brug dine egne
• Antibiotikaresistens: Ampicillin (AmpR), Kanamycin (KanR)

Kloning, PCR Kloning