Thermo Scientific™ VitroEase™ Bufferscreeningssæt og rengøringsmidler

De Thermo Scientific VitroEase Bufferscreeningskit giver præformulerede buffere og detergenter og en omfattende screeningsstrategi til at identificere optimale proteinbetingelser for enkeltpartikel-kryo-EM-prøveanalyse.

Funktioner af VitroEase Buffer Screening Kit inkluderer:
• Brugervenlighed 14 —buffere og 6 rengøringsmidler præformuleret i 10X koncentration klar til at blive tilsat din proteinprøve med minimal prøvefortynding
•Praktiske buffere —og rengøringsmidler forsynet med farvekodede hætter, der korrelerer med farvekodet screeningsstrategi
•Omfattende optimeret screeningsstrategi, —der omfatter to screeningsrunder med 24 gitter med forslag til fejlfinding
•Fleksibel bred —vifte af almindelige buffere og detergenter til cryo-EM prøveforberedelse tilstrækkelig til prøveoptimering af 400 gitter
•Validerede —komponenter og screeningsstrategi valideret med enkeltpartikel-kryo-EM-analyse Cryo-EM-

prøvescreening evaluerer proteinadfærd i forskellige buffere og additive betingelser med det endelige mål at identificere de optimale forhold, hvor proteinet er stabilt, tilfældigt orienteret og ligeligt fordelt i is. Kit-buffere er forsynet med pH-værdier fra 3,6 til 8,9 forblandet med forskellige salte og divalente kationer. Rengøringsmidler leveres i 10X koncentrationer med en letanvendelig tabel til at konvertere volumen til CMC-koncentration.

Den omfattende prøvescreeningsstrategi bruger to screeningsrunder og 24 gitter, hvilket tager cirka to dage at behandle (figur nedenfor). I første runde bestemmes optimal proteinkoncentration, buffer og pH-forhold. I anden omgang optimeres vaskemidler yderligere. En kondenseret strategi er også tilvejebragt ved hjælp af 8 gitter og tager en dag at behandle, som kan bruges, når der er lidt prøve tilgængelig eller til brug med sideindgang eller semi-automatiske prøveindlæsningssystemer, som Tundra Cryo-TEM.

De anbefalede screeningsstrategier er designet til brug med Thermo Scientific Vitrobot Mk4 og Krios , Glacios , Arctica mikroskoper med Autoloader-systemer og EPU multigrid.