Molecular Probes™ Violet Ratiometric Membran Asymmetri Probe/Dead Cell Apoptosis Kit, til flowcytometri

Det Violet Ratiometric Membran Asymmetri Probe/Dead Cell Apoptosis Kit giver en enkel og hurtig metode til påvisning af apoptose med døde celle-diskrimination ved flowcytometri. Den Violet Ratiometric Membran Asymmetri Probe, 4'-N,N-diethylamino-6-(N,N,N-dodecyl-methylamino-sulfopropyl)-methyl-3-hydroxyflavon (F2N12S), er et nyt violet exciterbart farvestof til påvisning af membranasymmetriændringer under apopoptose. Farvestoffet udviser en exciteret-state intramolekylær protonoverførsel (ESIPT) reaktion, hvilket resulterer i en dobbelt fluorescens med to emissionsbånd svarende til 530 nm og 585 nm, hvilket producerer en to-farve ratiometrisk reaktion på variationer i overfladeladning. Ratiometriske prober har flere fordele i forhold til traditionelle fluorokrom-mærkede reagenser. Den ratiometriske probe er en selvkalibrerende absolut parameter for apoptotisk transformation, som er uafhængig af probekoncentration, cellestørrelse og instrumentvariation, såsom fluktuationer i laserintensitet eller detektorernes følsomhed. Da apoptose modificerer overfladeladningen af den ydre folder af plasmamembranen, kan den violette membranasymmetriprobe F2N12S overvåge ændringer i membranasymmetri, der opstår under apoptose gennem en ændring i den relative intensitet af farvestoffets to emissionsbånd. F2N12S-sonden er kombineret med SYTOX(R) AADvanced døde cellefarvning, som kun er i stand til at passere gennem cellemembranen i sene apoptotiske eller nekrotiske celler, hvilket tillader skelnen fra tidlige apoptotiske celler. Prøver kan analyseres efter 5 minutters inkubation ved stuetemperatur og kræver ikke specielle buffere eller vasketrin. Dette kit kan parres med andre reagenser som f.eks MitoProbe™ DiIC1(5) eller annexin V til multiparametrisk analyse af apoptose og levedygtighed. Dette reagenssæt giver forskere mulighed for at maksimere anvendeligheden af deres instrumenter ved at bruge den violette laser. Hvert sæt indeholder tilstrækkelige reagenser til∼ 100 flowcytometri tests.

Se en valgvejledning for alle apoptoseanalyser til flowcytometri .