Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit til subkloning uden kompetente celler

Hvert sæt bruger pCR™ 2.1-TOPOTA vektor med bekvemme restriktionssteder til subkloning. Kloningssættene fås med en række kompetente celler (tilgængelig separat) eller uden kompetente celler, afhængigt af dine behov og budget. Resistent over for Kanamycin (KanR) og Zeocin™ (ZeoR).

pCR™ 2,1-TOPO; TA vektor: kloning og subkloning enkelhed
Den pCR 2.1-TOPO TA-vektor er lineariseret med 3'-thymidin (T) udhæng til direkte ligering afTaq polymerase-–amplificerede PCR-produkter (TA-kloning) og er“ aktiveret” med kovalent bundet Topoisomerase I. Der er ingen grund til at tilføje ligase, og kloningen er fuldført på 5 minutter. EcoRI-steder, der flankerer PCR-produktets indsættelsessted, giver mulighed for nem udskæring af inserts eller brug en hvilken som helst kombination af 15 bekvemme restriktionssteder, der flankerer din PCR-insertion for nem, retningsbestemt subkloning.

pCR 2.1-TOPO TA klon udvælgelse og
manipulation pCR 2.1-TOPO TA-vektor indeholder både ampicillin- og kanamycinresistensmarkører og Lac Z-genetα til blå/hvid screening.

Forenklet TOPO -baseret kloning
ved hjælp af TOPO kloningsteknologi, er der ikke behov for PCR-primere indeholdende specifikke sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpræparation eller andre tidskrævende DNA-manipulationstrin. Bare tilføj din PCR-reaktion direkte til den medfølgende topoisomerase-ladede vektor, inkuber 5 minutter og transformer E. coli -kompetente celler.

Effektiv kloning Med
op til 95 % af klonerne, der bærer den ønskede indsats, kan du screene færre kloner, hvilket sparer tid og penge. De pCR 2.1-TOPO TA-vektor, der bruges i dette sæt, leveres med 3'-T-udhæng til effektiv ligering afTaq –polymerase-amplificerede PCR-produkter, som indeholder 3'-A-udhæng.

Standarden inden for kloning
Når det kommer til kloning, TOPO kloningsteknologi har været en pålidelig partner for tusindvis af videnskabsmænd i over ti år. Hurtig, nem at bruge og effektiv, TOPO kloning er blevet anvendt på mange forskellige vektorer til en bred vifte af anvendelser.

TOPO TA Cloning Kits til subkloning: sæt
muligheder Den TOPO TA Cloning Kit til sekvensering kan købes med en række kompetente celler, der giver forskellige fordele afhængigt af dine behov:

• Generel kloning: TOP10 celler (kat. nr. K4500-01, K4500-40)
• Højeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat. nr. K4560-01, K4560-40)
• Generel kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R-celler (kat. nr. K4520-01, K4520-40)
• Hurtig vækst: Mach1™ -T1R Kemisk Kompetent E. Coli (Kat. Nr. K4510-20)
• Giv din egen: for fleksibilitet og for at spare penge (kat. nr. 450641)

• Hurtigt og nemt: gå fra PCR til kloner på kun tre trin og på så lidt som 5 minutter hands-on tid
• Effektiv: opnå op til 95% kloner med korrekt indsættelse
• Bevist: pålidelig ydeevne i over et årti med over 4.000 citater
• Simpelt: ingen ligase, post-PCR procedurer eller PCR-primere indeholdende specifikke sekvenser er påkrævet
• Vektor: pCR 2.1-TOPO TA vektor: subkloningsvektor med 15 praktiske restriktionssteder, der flankerer dit insert for nem, retningsbestemt subkloning
• Kloningsmetode: TOPO TA kloning: Topoisomerase I-–baseret, 5-minutters ligering af PCR-produkter med 3′ -A udhæng (Taq polymerase amplificeret) til TOPO vektor med T-udhæng
• Kompetente celler: forskellige muligheder: vælg mellem sæt med enten generelle, højeffektive, bakteriofag T1-–resistente, hurtigtvoksende kompetente celler (tilgængelig separat) eller brug dine egne

Kloning, PCR Kloning