Thermo Scientific™ Pierce™ Høj pH omvendt fase peptidfraktioneringssæt

Thermo Scientific Pierce Høj pH-omvendt fase-peptidfraktioneringskit øger proteinidentifikation fra LC/MS-analyse gennem ortogonal peptidfraktionering af komplekse peptidprøver.

• Let at bruge - harpiks leveres i engangs-spin-søjleformat
• Forbedrede proteinidentifikationer - proteinidentifikationer øget med≥ 50 % sammenlignet med ufraktionerede prøver
• Reproducerbar - elueringsprofiler og fraktioneret opløsning varierer med mindre end 20 %
• Optimeret - robust procedure til maksimal proteinidentifikation og peptidgenvinding, samtidig med at fraktioneret overlap minimeres
• Kompatible - reagenser valideret med en række komplekse prøver, inklusive TMT™ -mærkede peptider

For at muliggøre dyb proteomsekventering er det ofte nødvendigt at reducere prøvekompleksiteten ved fraktionering i en ortogonal dimension før LC/MS-analyse. Pierce High pH Reversed-Phase Peptide Fractionation Kit anvender høj pH omvendt fase kromatografi til at adskille peptider ved hydrofobicitet og giver fremragende ortogonalitet til lav pH omvendt fase LC-MS gradienter.
Sættet er designet til at forbedre proteinidentifikation gennem brug af en proprietær omvendt fase-harpiks i et letanvendeligt spin-søjleformat med en høj-pH-fraktioneringsprotokol. I modsætning til stærk kationbytning (SCX)-fraktionering, kræver høj-pH-omvendt-fase-fraktionerne ikke et yderligere afsaltningstrin før LC/MS-analyse.
Peptidfraktioneringssættet med høj pH-værdi inkluderer en buffer med høj pH-værdi (0,1 % triethylamin) og tolv spin-søjler, der indeholder pH-resistent omvendt-fase-harpiks. Hver omvendt-fase fraktioneringsspinkolonne muliggør fraktionering af 10 til 100 g μpeptidprøve ved hjælp af en mikrocentrifuge.
Native, phosphorylerede, Tandem Mass Tag™ (TMT )-mærkede prøver og andre komplekse peptidblandingsprøver kan fraktioneres ved hjælp af dette kit. Kombination af søgeresultaterne genereret af de individuelle fraktioner hjælper med at forbedre proteinsekvensdækningen og øger antallet af identificerede proteiner i forhold til ufraktionerede prøver.
Ansøgninger:

• Reduktion af prøvens kompleksitet for at identificere mål af interesse
• Udførelse af systembiologiske studier
• Reduktion af prøvekompleksitet for at forbedre kvantificeringsundersøgelser