Thermo Scientific™ Pierce™ Firefly Luc One-Step Glow Assay Kit

De Thermo Scientific Pierce Ildflue One-Step Luc Glow Assay Kit måler ildflueluciferaseaktivitet i pattedyrcellekultur ved hjælp af et enkelt reagenstilsætningstrin, hvilket gør det ideelt til high-throughput screening (HTS) applikationer.

Dette luciferase-assay-kit af glød-type er designet til brug med dyrkede pattedyrsceller, der er transficeret med vektorer, der udtrykker det passende ildflue-luciferase-reporterenzym. Flere funktioner gør sættet særligt velegnet til luminometre uden injektorer og til high-throughput screening (HTS) applikationer. Den praktiske et-trins, homogene protokol minimerer håndteringstrin for at understøtte brugen af automatisering. Kombiner blot den medfølgende substratopløsning og assaybuffer for at lave en enkelt arbejdsopløsning, og tilsæt den derefter til mikropladebrønde, der indeholder de transficerede, behandlede celler. Det stabile signaloutput (glød) af dette system giver fleksibilitet med hensyn til inkubationstid. Når det bruges med Thermo Scientific Firefly Luc Plasmids, kittet giver et meget følsomt bioluminescerende reporter-assaysystem til påvisning af promotor- eller pathway-aktivitet.

Højdepunkter:

• Sensitive - meget følsom påvisning af ildflueluciferaseaktivitet
• Praktisk - et-trins, bland-og-læs protokol; ingen yderligere reagenser påkrævet
• Stabil - øget signalhalveringstid og stabilitet sammenlignet med flash-assays
• Enkel - kræver ikke et luminometer med injektorer
• Automatiseringsvenlig - modtagelig for assays med høj kapacitet

Inkluderer:
Analysebuffer og substratopløsning (100X)
Kræver:
Firefly luciferase og luminometer eller andet instrument, der er i stand til at overvåge luminescens, som f.eks Thermo Scientific Luminoskan Opstigning og Varioskan Flash mikropladelæsere.
Ansøgninger:

• Promotorundersøgelser til analyse af cis- og transvirkende regulatoriske elementer
• Narkotikascreening
• siRNA og miRNA screening
• Multipleksede assays til undersøgelse af effekter uden for mål
• Protein lokalisering reporter assays
• Analyse af signaltransduktionsveje

Produktdetaljer:
Firefly luciferase er et 62 kDa protein produceret i naturen af flere arter af Lampyridae-familien af biller, som omfatter slægterne Photinus og Luciola . Thermo Scientific Red Firefly Luciferase har et emissionsområde på 560-700nm (λ max = 613nm). Bioluminescerende signal fra ildflueluciferase stammer fra oxidationen af D-Luciferin. Lysoutput fanget ved hjælp af et luminometer kan korreleres med mængden af ildflueluciferaseprotein, der produceres og bruges til at bestemme aktiviteten af den promotor, der driver ildflueluciferaseekspression. Firefly luciferase bioluminescens giver forskere en ikke-radioaktiv analyse til måling af transkriptionel aktivitet af regulatoriske elementer. Firefly luciferase reporteraktivitet kan bruges til at bestemme promotoraktivitet, til at studere opstrøms pathway-aktivitet i cellen eller til at bestemme effekten af aktivatorer eller inhibitorer.