Thermo Scientific™ DNase I-opløsning (1 enhed/μ L), RNase-fri

Deoxyribonuclease I (DNase I) er et enkelt, glycosyleret polypeptid, der nedbryder uønsket enkelt- og dobbeltstrenget DNA. Enzymet virker ved at spalte DNA i 5'-phosphodinukleotid og små oligonukleotidfragmenter. DNase I tilsættes almindeligvis til cellelysereagenser for at fjerne viskositeten forårsaget af DNA-indholdet i bakterielle cellelysater eller for at fjerne DNA-skabelonerne fra RNA'er produceret ved in vitro-transkription. To kvaliteter af DNAse tilbydes, en tilstrækkelig til proteinarbejde og en, der er anvendelig til enhver applikation, der kræver fordøjelse af DNA, hvor det er afgørende at undgå beskadigelse af RNA.

Højdepunkter:

• Nedbryder og fjerner uønsket DNA fra prøver
• Spalter både enkeltstrenget og dobbeltstrenget DNA
• Kompatibel med Thermo Scientific Pierce Cellelysereagenser
• Reducerer viskositeten af bakterielle lysater (proteinekstrakter) for at lette pipettering
• Leveres som 50 % glycerol-stamopløsninger i 10 mM Tris-HCl pH 7,5, 10 mM CaCl ₂ , 10 mM MgCl ₂
• Tilgængelig i to praktiske formater: RNase-testet for at beskytte RNA (delnr. 89836) og bekvem proteinekstraktionskvalitet (delnr. 90083)

• Calciumioner er nødvendige for DNase I-aktivitet, og spormængder af Ca++ kan være til stede i høje nok koncentrationer til, at DNase I kan være aktiv; dog kan brugen af EGTA eller calciumfri buffere reducere DNase I-aktivitet til uopdagelige niveauer
• Høje niveauer (dvs. 100 mM) af monovalente ioner såsom Na+ og K+ vil reducere DNase I-aktivitet
• DNase I inaktiveres ved opvarmning til 65 C °i 10 minutter
• Kunitz-enhed: 1 Kunitz-enhed er den mængde enzym, der kræves for at forårsage en stigning i absorbans ved 260 nm på 0,001/min/mL ved °25 C i 0,1 M NaOAc, pH 5,0, på grund af nedbrydningen af højt polymeriseret DNA
• Nedbrydningsanalyseenheder: 1 enhed er defineret som den mængde enzym, der kræves for fuldstændigt at nedbryde 1 mg plasmid-DNA på 10 minutter ved 37 °C i 10 mM Tris-HCl, pH 7,5, 50 mM MgCl ₂ , 13 mM CaCl ₂

• Visuelt: Klar væske
• Koncentration: 1 enhed/ml
• Aktivitet:≥ 100.000 enheder/mg protein
• RNase kontaminering: 20 enheder frigives< 2 % ikke-ethanol udfældelig, når den inkuberes med 3H-mærket Poly(A) RNA
• Funktionsanalyse: 1 μL enzym nedbrydes< 5% RNA, men nedbryder 100% DNA

• Visuelt: Klar, farveløs væske, fri for uopløseligt materiale
• Enheder:≥ 2500 enheder/ml
• Enhedsdefinition: 1 enhed er defineret som den mængde enzym, der kræves for at frembringe en stigning i absorbans ved 260 nm på 0,001/min/mL ved 25 °C af højpolymeriseret DNA

• Elimination af viskositet forårsaget af DNA i proteincellelysater
• Fjernelse af DNA-skabeloner fra RNA'er produceret ved in vitro-transkription