Invitrogen™ TaqMan™ Hurtigt avanceret Cells-to-CT™ Kit

De TaqMan Hurtigt avanceret Cells-to-Ct Kit er et komplet cellelysatsystem designet til genekspressionsanalyse direkte fra dyrkede celler uden RNA-oprensning. TaqMan Hurtig avanceret Cells-to-Ct cellelysereagenser leveres med den højeste følsomhed Fast Advanced revers transkriptionsenzymblanding, 2x RT-buffer og best-in-class TaqMan Hurtig avanceret mastermix. De TaqMan Hurtig avanceret Cells-to-Ct Kit giver dig al den følsomhed, du har brug for i den hurtigste tilgængelige workflow: få genekspressionsanalyseresultater fra en hel plade af celler på omkring 80 minutter.

• Komplet —optimeret arbejdsgang inkluderer cellelysereagenser med gDNA-fjernelse, ny Fast Advanced RT-enzymblanding, buffer og ny TaqMan Hurtig avanceret mastermix
• Hurtig —7-minutters prøveforberedelse, inklusive DNase-behandling, ved stuetemperatur
• Let —lysér prøver i et rør eller direkte i dyrkningsplader
• Robust —genekspressionsanalyse på 10 100.000 celler –pr. prøve; resultater svarende til dem fra oprenset RNA
• Efficient —indeholder tilstrækkelige reagenser til at generere 500 realtids PCR-resultater fra 100 startprøver

Unik metode eliminerer behovet for at isolere RNA fra cellekulturer

De Cells-to-Ct metoden indeholder et unikt lyseringsreagens, der lyserer celler og beskytter RNA. DNA-fjernelse sker samtidigt i det 5-minutters lange lyseringstrin for at spare tid og forbedre brugervenlighed. Lysering stoppes derefter ved tilsætning af en 'Stop Solution', der irreversibelt binder til lysereagenserne.

De TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit indeholder revers transkription (RT) reagenser til cDNA-syntese og TaqMan Hurtig avanceret mastermix til PCR-analyse i realtid. TaqMan primer/probe sæt sælges separat.

Enkel prøveforberedelse på 7 minutter

De TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit er designet til 10 100.000 –dyrkede celler/prøve. Celler vaskes i PBS og lyseres i opløsning i fem minutter ved stuetemperatur; DNase-behandling kan udføres samtidigt. Lysering afsluttes ved stuetemperatur ved en 2-minutters inkubation med stopopløsning. Lysaterne er nu klar til revers transkription eller opbevaring kl– °20 C på kort sigt eller -80 °C på længere sigt.

Maksimer sensitiviteten af detektion

I modsætning til nogle konkurrerende kits, der begrænser mængden af lysat i RT-reaktionen til 10 %, TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit kan rumme 45 % af det samlede RT-reaktionsvolumen som cellelysat. Derudover kan cDNA omfatte op til 45 % af real-time PCR-reaktionsvolumenet. Det store lysatvolumen i den optimerede RT-reaktion sammen med det store cDNA-volumen i den efterfølgende realtids-PCR ved hjælp af TaqMan Hurtig avanceret mastermix, fører til maksimal følsomhed. Masterblandingen forstærker målet præcist og nøjagtigt, hvilket muliggør påvisning af små mængder mål, såsom transkripter udtrykt ved lave niveauer.

Reduceret prøvetab og overførselsfejl

Fordi prøver kan behandles direkte i kulturbrønde (96 eller 384 brønde), minimeres prøvehåndtering og potentialet for prøvetab eller overførselsfejl, hvilket letter hurtig behandling med høj gennemstrømning. I modsætning til gammeldags RNA-isoleringsprotokoller med flere trin kræves ingen opvarmnings-, vask- eller centrifugeringstrin. Sættet forenkler i høj grad en besværlig –30 60 minutters proces og reducerer den til 7 minutter.

Kompatibel med guldstandard TaqMan Genekspressionsassays

De TaqMan Hurtigt avanceret Cells-to-CT Kit workflow muliggør uovertruffen genekspressionsevaluering med enhver af> 700.000 TaqMan Genekspressionsassays. Dette sæt er blevet grundigt testet for specificitet med et bredt udvalg af TaqMan Genekspressionsassays.

Gennemprøvet præstation, afprøvet sammen

Alle komponenter i TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit er blevet optimeret til ensartet og pålidelig ydeevne. Dette fjerner gætteriet involveret i at samle separate prøveforberedelse, RT og real-time PCR-kits. Og den TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit er blevet valideret med TaqMan Genekspressionsanalyser for ekstra kvalitetssikring, der giver dig den følsomhed, du har brug for, i den hurtigste prøve-til-svar-workflow, der er tilgængelig.