Invitrogen™ TaqMan™ Cells-to-CT™ Express Kit

De TaqMan Cells-to-CT Express Kit er et komplet cellelysatsystem designet til genekspressionsanalyse direkte fra dyrkede celler uden RNA-oprensning. Det muliggør RT-qPCR med den højeste følsomhed og hurtigste arbejdsgang ved hjælp af kun fem komponenter: Express Lysis Buffer, Express ezDNase , Express RT Master Mix, RT-kontroller og vores bedste i klassen TaqMan Hurtig avanceret mastermix. De TaqMan Cells-to-CT Express Kit giver den følsomhed, du har brug for i den hurtigste tilgængelige workflow: RT-qPCR-resultater for genekspressionsanalyse på cirka 70 minutter.

Funktioner af TaqMan Cells-to-CT Express Kit inkluderer:

• Ekstraordinær lethed og hastighed —96 prøver klar til RT-qPCR på så lidt som 5 minutter
• Ingen kedelig RNA-rensning —ingen kolonner, opvarmning eller centrifugering
• Verificerede arbejdsgange —komplet sæt reagenser optimeret til at arbejde effektivt lige ud af kassen
• Miljøvenligt —sættet er REACH-kompatibelt, har færre komponenter og kræver færre pipetteringstrin, hvilket reducerer plastomkostningerne
• Kits i rigtig størrelse til automatisering —fås i 2500 reaktionsstørrelser, der inkluderer både lysis- og RT-komponenter

Optimeret kemi uden behov for stopløsning

Genekspressionsanalyse fra direkte cellelyse er gjort enkel med vores TaqMan Cells-to-CT Express Kit. Med kun ét trin til cellelyse og intet behov for tilføjelse af en stopopløsning muliggør vores Express-teknologi en hurtig arbejdsgang med følsomme, nøjagtige og reproducerbare resultater. 10 100.000 –celler lyseres under anvendelse af Express Lysis Solution. Den valgfrie medtagelse af ezDNase til Express Lysis Solution muliggør fjernelse af genomisk DNA under cellelyse. Efter en 5-minutters inkubation ved stuetemperatur anvendes lysatet direkte til revers transkription ved hjælp af SuperScript IV VILO Master Mix. Når RT-reaktionen er afsluttet, udføres qPCR-analyse vha TaqMan Hurtig avanceret mastermix og en TaqMan Genekspressionsassay.

Strømlinet arbejdsgang, der giver mulighed for hurtige, nøjagtige og følsomme resultater

RNA fremstillet ved hjælp af TaqMan Cells-to-CT Express-teknologi fremskynder og strømliner væsentligt genekspressionsanalyse. Cellelysater udviser sensitivitet og specificitet bedre end eller svarende til RNA ekstraheret ved anvendelse af traditionelle spinsøjleisoleringsmetoder. Lyseringsproceduren forbereder samtidig cellelysater til RT-qPCR og fjerner genomisk DNA på kun fem minutter. Lyseringstrinnet er nemt at automatisere med robotplatforme til højkapacitetsbehandling af 96- eller 384-brøndsplader, fordi det udelukkende foregår ved stuetemperatur. Proceduren er også økonomisk, da der kun er nogle få pipetteringstrin, og for celler dyrket i 96- eller 384-brøndsplader, ingen prøveoverførsel. Den højeffektive SuperScript IV VILO RT Master Mix transkriberer selv det sværeste (nedbrudte og lavt rigelige) RNA, mens den typiske reaktionstid reduceres med 10 minutter. Derudover TaqMan Cells-to-CT Express Kit er kompatibelt med over 700.000 TaqMan Genekspressionsassays.

Maksimer sensitiviteten af detektion

I modsætning til nogle konkurrerende kits, der begrænser mængden af lysat i RT-reaktionen til 10 %, TaqMan Cells-to-CT Express Kit kan rumme 45 % af det samlede RT-reaktionsvolumen som cellelysat. Derudover kan cDNA omfatte op til 45 % af real-time PCR-reaktionsvolumenet. Det store lysatvolumen i den optimerede RT-reaktion sammen med det store cDNA-volumen i den efterfølgende realtids-PCR ved hjælp af TaqMan Hurtig avanceret mastermix, fører til maksimal følsomhed. Masterblandingen forstærker målet præcist og nøjagtigt, hvilket muliggør påvisning af små mængder mål, såsom transkripter udtrykt ved lave niveauer.