Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, med pCR ™II Vector og One Shot™ INV αF' Kemisk Kompetent E. coli

T7- og Sp6-promotorerne af pCRII-vektoren tillader in vitro- transskription af insertet for at producere sense- eller anti-sense-produkter. De TA Cloning Kit Dual Promoter bruger pCRII-kloningsvektoren og ExpressLink T4 DNA Ligase for at generere et ligeringsprodukt i et femten minutters ligeringstrin ved stuetemperatur. Reaktioner giver typisk udbytte> 80 % rekombinanter indeholdende inserts.

• Hurtig og bekvem: 15-minutters ligering ved stuetemperatur
• Effektiv: blå/hvid afskærmning og> 80% kloner med korrekt insert
• Fleksibel: valg af kanamycin- eller ampicillinresistens til fleksibel antibiotikaudvælgelse
• Problemfri: eliminerer alle enzymatiske modifikationer af PCR-produktet
• Strømlinet: kræver ikke brug af PCR-primere, der indeholder restriktionssteder
• 3'-T udhæng til direkte ligering afTaq -amplificerede PCR-produkter
• T7- og Sp6-promotorer til in vitro RNA-transkription og sekventering
• Alsidig polylinker med flankerende Eco R I-steder til nem udskæring af skær
• M13 frem og tilbage primersteder til sekventering

• Hvordan TA Cloning Virker \
• Taqpolymerase har ikke-skabelonafhængig aktivitet, der tilføjer enkelt deoxyadenosin (A) til 3'-ender af PCR-produkter
• Lineariseret vektor leveret i dette sæt har enkelte 3'-deoxythymidin (T)-rester
• Tillader PCR-inserts at ligere effektivt med vektor
• Sætkonfigurationer
• TA Cloning Sættet tilbydes i en række forskellige konfigurationer: med One Shot INVF' Kemisk Kompetent E. coli (K2050-01 og K2050-40), One Shot TOP10F' Kemisk Kompetent E. coli (K2060-01 og K2060-40), og uden kompetente celler (K2750-20 og K2750-200 og K2750-40- og 0-aktionssæt)

Kloning, PCR Kloning