Få mere at vide
Thermo Scientific™ T4 DNA Ligase, HC (30 U/μ L)
Shop alle Thermo Scientific produkterDescription
Katalysér dannelsen af en phosphodiesterbinding mellem sidestillede 5'-phosphat- og 3'-hydroxyltermini i duplex-DNA eller RNA med Thermo Scientific™ T4 DNA Ligase. Enzymet reparerer enkeltstrengede hak i duplex DNA, RNA eller DNA/RNA hybrider. Det forbinder også DNA-fragmenter med enten sammenhængende eller stumpe termini, men har ingen aktivitet på enkeltstrengede nukleinsyrer.
De T4 DNA Ligase kræver ATP som en co-faktor.
Højdepunkter
- Aktiv i Themo Scientific restriktionsenzym-, PCR- og RT-buffere (når suppleret med ATP )
- Hurtig– sticky-end ligering er afsluttet på 10 minutter ved stuetemperatur
- Leveres med PEG-opløsning til effektiv ligering af stump ende
Applikationer
- Kloning af restriktionsenzym-genererede DNA-fragmenter
- Kloning af PCR-produkter
- Sammenføjning af dobbeltstrengede oligonukleotidlinkere eller adaptere til DNA
- Stedstyret mutagenese
- Amplificeret fragmentlængde polymorfi (AFLP )
- Ligase-medieret RNA-detektion ( se reference 3)
- Nick reparation i duplex DNA, RNA eller DNA/RNA hybrider
- Selvcirkularisering af lineært DNA.
Bemærk
- Indbinding af T4 DNA Ligase til DNA kan resultere i et båndskift i agarosegeler. For at undgå dette skal du inkubere prøver med 6X DNA Loading Dye& SDS-°opløsning ved 70 C i 5 minutter °eller 65 C i 10 minutter og afkøl på is før elektroforese.
- Volumenet af ligeringsreaktionsblandingen bør ikke overstige 10 % af det kompetente cellevolumen i transformationsprocessen.
- Før elektrotransformation fjernes T4 DNA Ligase fra ligeringsblandingen ved spin kolonne eller chloroform ekstraktion. Det ekstraherede DNA kan udfældes yderligere med ethanol.
Specifications
Specifications
| Koncentration | 30 U/μ L |
| Enzym | DNA Ligase |
| Kompatibel buffer | 10X T4 DNA Ligase buffer |
| Mængde | 5.000 enheder |
| Produkttype | T4 DNA Ligase |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Your input is important to us. Please complete this form to provide feedback related to the content on this product.