Invitrogen™ SYBR™ Grøn Hurtig Avanceret Cells-to-CT™ Kit

SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct Kit er et komplet cellelysatsystem designet til genekspressionsanalyse direkte fra cellekulturer uden RNA-oprensning. SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct cellelysereagenser leveres med Cells-to-Ct Fast Advanced revers transkriptionsenzymblanding med højeste sensitivitet, 2X RT-buffer og PowerUp SYBR Green masterblanding, som er bedst i sin klasse. SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct Kit giver dig den sensitivitet, du har brug for i den hurtigste tilgængelige arbejdsgang: få genekspressionsanalyseresultater fra en hel plade med celler på cirka 1,5 time.

• Komplet —optimeret arbejdsgang inkluderer cellelysereagenser med gDNA-fjernelse, ny Fast Advanced RT-enzymblanding, buffer og ny PowerUp SYBR Green Fast Advanced Master Mix
• Hurtig—prøveforberedelse på 7 minutter, inklusive DNase-behandling, ved stuetemperatur
• Nem—lysering af prøver i et rør eller direkte i kulturplader
• Robust—genekspressionsanalyse på 10–100.000 celler pr. prøve, resultater svarende til dem fra oprenset RNA
• Effektiv—indeholder tilstrækkelige reagenser til at generere 1000 realtids-PCR-resultater fra 100 startprøver

Unik metode eliminerer behovet for at isolere RNA fra cellekulturer
Cells-to-Ct-metoden har en unikt lyseringsreagens, der lyserer celler og beskytter RNA. DNA-fjernelse sker samtidigt i det 5-minutters lange lyseringstrin for at spare tid og forbedre brugervenlighed. Lysering stoppes derefter ved tilsætning af en 'Stop Solution', der irreversibelt binder til lysereagenserne.

SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit indeholder Cells-to-Ct Fast Advanced revers transkription (RT)-reagenser til cDNA-syntese og PowerUp SYBR Green Master Mix til realtids-PCR-analyse. Primersæt leveres af brugeren.

Enkel prøveforberedelse på 7 minutter
SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit er designet til 10–100.000 cellekulturer/prøve. Celler vaskes i PBS og lyseres i lyseringsopløsning i fem minutter ved stuetemperatur; DNase-behandling kan udføres samtidigt. Lysering afsluttes ved stuetemperatur ved en 2-minutters inkubation med stopopløsning. Lysaterne er nu klar til revers transkription eller opbevaring ved –20°C på kort sigt eller -80 C på længere sigt.

Maksimer sensitiviteten af detektion
I modsætning til nogle konkurrerende sæt, der begrænser mængden af lysat i RT-reaktionen til 10 %, kan SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit rumme 45 % af det samlede RT-reaktionsvolumen som cellelysat. Derudover kan cDNA omfatte op til 30% af realtids-PCR-reaktionsvolumenet. Det store lysatvolumen i den optimerede RT-reaktion, sammen med det store cDNA-volumen i den efterfølgende realtids-PCR ved brug af PowerUP SYBR Green Master Mix, resulterer i maksimal sensitivitet. Masterblandingen forstærker målet præcist og nøjagtigt, hvilket muliggør påvisning af små mængder mål, såsom transkripter udtrykt ved lave niveauer.

Reduceret prøvetab og overførselsfejl
Fordi prøver kan behandles direkte i kulturbrønde (96 eller 384 brønde), minimeres prøvehåndtering og potentialet for prøvetab eller overførselsfejl, hvilket letter hurtig behandling med høj gennemstrømning. I modsætning til gammeldags RNA-isoleringsprotokoller med flere trin kræves ingen opvarmnings-, vask- eller centrifugeringstrin. Sættet forenkler i høj grad en besværlig 30–60 minutters proces og reducerer den til 7 minutter.

Gennemprøvet præstation afprøvet sammen
Alle komponenter i SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit er blevet optimeret til ensartet og pålidelig præstation. Dette fjerner gætteriet involveret i at samle forskellige sæt til prøveforberedelse, RT og realtids-PCR, hvilket giver dig den sensitivitet, du har brug for i den hurtigste tilgængelige arbejdsgang fra prøve til svar.