Invitrogen™ SuperScript™ IV Template Switching RT Master Mix

Invitrogen SuperScript IV Template-Switching RT Master Mix er designet til høj skabelonskiftningseffektivitet i cDNA-syntesereaktioner. Den indeholder SuperScript IV Reverse Transcriptase , RNase-inhibitor og alle andre revers transkriptionsreaktionskomponenter i et bekvemt forblandet format. Kun RNA-template, RT-primer og template switching oligo (TSO) efter eget valg skal tilføjes.

Funktionerne i SuperScript IV Template-Switching RT Master Mix inkluderer:
•Formuleret til højkvalitets cDNA-syntese i fuld længde
• Indeholder proprietær forstærker for at maksimere skabelonskifteeffektiviteten
• Enestående følsomhed til nem påvisning af mål med lav abundance (så lavt som enkeltcelle eller 2 pg total RNA)
• Cellelysebuffer inkluderet til direkte cDNA-syntese uden RNA-oprensning

Procedureoversigt
For at maksimere skabelonskiftningseffektiviteten indeholder SuperScript IV Template-Switching RT Master Mix proprietær skabelonskifteforstærker og udnytter den terminale deoxynukleotidyltransferase (TdT ) aktivitet af SuperScript IV Reverse Transcriptase . Når den omvendte transkriptase når 5’ slutningen af RNA-skabelonen, TdT aktivitet tilføjer –13 ekstra nukleotider til cDNA-enden, hvilket muliggør binding af skabelonskiftende oligo og inkorporering af kendt sekvens ved 3’ slutningen af det resulterende cDNA. Dette cDNA kan bruges til amplifikation ved PCR, genekspressionsanalyse ved real-time PCR eller som skabelon for 5 RACE, ’RNA-seq eller anden streng cDNA syntese. Denne mastermix er kompatibel med et bredt inputområde af totalt RNA (fra 2 pg til 4μ g) og leveres med lyseringsbuffer for at muliggøre direkte cDNA-syntese fra pattedyrsceller (1 1.000 –celler pr. prøve).

Relaterede produkter
SuperScript IV Template-Switching RT Master Mix er kompatibel med forskellige RT-primere og selvdesignede skabelonskiftende oligoer. Vi tilbyder skabelonskift Oligo (Kat. Nr. A65427) og Capturing Oligo (dT) Primer (A65429), begge indeholdende den samme adaptersekvens komplementær til Preamplification Primer (A65428). Alternativt er et komplet sæt reagenser til skabelonskiftende cDNA-syntese og præamplifikation tilgængeligt i SuperScript IV Single Cell/Low-Input cDNA PreAmp Kit (11752048).