Invitrogen™ SuperScript™ IV omvendt Transcriptase

Beskrivelse

SuperScript IV Reverse Transcriptase (RT) er en proprietær MMLV-mutant med overlegen robusthed og pålidelighed i RT-reaktioner. Det er væsentligt forbedret i forhold til SuperScript III RT, hvad angår inhibitorresistens, processivitet og reaktionshastighed, samtidig med at det bibeholder alle fordelene ved dette enzym, herunder øget termostabilitet, højeffektiv cDNA-syntese i fuld længde og reduceret RNase-aktivitet. SuperScript IV RT er designet til at give pålidelig, konsistent og hurtig cDNA-syntese ved tilstedeværelse af inhibitorer, der findes i en lang række prøver, som får andre tilgængelige RT'er til at fungere ineffektivt.

SuperScript IV RT tilbyder fordele ved standard såvel som forhøjede temperaturer i forhold til klonet AMV og ThermoScript RT, herunder højere sensitivitet, inhibitortolerance og evne til at arbejde med nedbrudt RNA.

Funktioner ved SuperScript IV Reverse Transcriptase inkluderer:

• Betydeligt forbedret resistens over for inhibitorer, der kan interferere med cDNA-syntese
• Robust og specifik cDNA-syntese for en lang række prøvetyper
• Hurtigere revers transkriptase-reaktion reducerer inkubationstiden fra >50 minutter til 10 minutter
• Bedre processivitet sammenlignet med SuperScript III RT

SuperScript IV RT er det bedste valg til alle RT-PCR- og qRT-PCR-applikationer i SuperScript-produktfamilien, når reproducerbarhed og pålidelighed er det primære problem. Det er også vores bedste RT, når inhibitorer i RNA-prøven kan interferere med cDNA-syntese, hvilket fører til bias i genekspressionsundersøgelser.

Kilde
Oprenset fra E. coli, der udtrykker pol-genet af M-MLV, modificeret for at øge termostabilitet og halveringstid, processivitet, inhibitorresistens og for at reducere RNase H-aktivitet

Enhedsdefinition
Én enhed af SuperScript IV RT er den mængde enzym, der kræves for at inkorporere 1 nmol deoxyribonukleotid ind i syreudfældeligt materiale på 10 minutter ved 37°C under anvendelse af poly(A) oligo(dT)_12-18 som skabelon/primer.

Enhedsreaktionsbetingelser
50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM MgCl₂, 10 mM DTT, 50 mM KCI, 0,5 mM dTTP, 0,4 MBq/ml [^3H]-dTTP, 0,4 mM poly(A) oligo (dT)_12-18 og enzym i 20 μl i 10 minutter ved 37°C.