Få mere at vide
Invitrogen™ SuperScript™ IV første-strengs syntesesystem
Beschreibung
SuperScript IV First-Strand Synthesis System til RT-PCR, tilgængeligt med eller uden ezDNase, er optimeret til syntese af førstestrengs-cDNA fra oprenset poly(A)+ eller total RNA. Systemet inkluderer SuperScript IV Reverse Transcriptase (RT), en proprietær MMLV-mutant, der producerer robust og pålidelig cDNA-syntese i RT-reaktioner. SuperScript IV First-Strand Synthesis System med ezDNase har desuden evnen til at fjerne potentiel genomisk DNA-kontamination.
SuperScript IV-syntesesystemet er væsentligt forbedret i forhold til systemet baseret på SuperScript III med hensyn til inhibitorresistens, processivitet og reaktionshastighed, samtidig med at alle fordelene ved det tidligere system bibeholdes, herunder øget termostabilitet, højeffektiv cDNA-syntese i fuld længde og reduceret RNase-aktivitet. SuperScript IV-systemet er designet til at give pålidelig, konsistent og hurtig cDNA-syntese ved tilstedeværelse af inhibitorer, der findes i en lang række prøver, der får andre aktuelt tilgængelige RT'er til at fungere ineffektivt.
Det ekstremt forenklede genomiske DNA-fjernelsestrin i SuperScript IV First-Strand Synthesis System med ezDNase reducerer dramatisk tiden for hele revers transkriptionsprotokollen og reducerer mulig variation i genekspression på grund af RNA-tab eller beskadigelse under konventionel DNase-behandling. SuperScript IV-syntesesystemet med ezDNase er det bedste valg, hvad angår præstation og fleksibilitet til RT-PCR-applikationer. Vi anbefaler det til alle RT-PCR-applikationer, især når reproducerbarhed og pålidelighed er den primære bekymring, og når inhibitorer i RNA-prøven kan interferere med cDNA-syntese, hvilket fører til bias i genekspressionsundersøgelser.
Begge SuperScript IV First-Strand Synthesis-systemer indeholder alle komponenter, der er nødvendige for RT-reaktioner, plus et ekstra kontrolgen og primere, og giver fleksibilitet til at tilpasse RT-opsætningen, så den passer til behovene for din applikations.
Funktionerne i SuperScript IV First-Strand Synthesis System inkluderer:
- Betydeligt forbedret resistens over for en række forskellige inhibitorer, der kan interferere med cDNA-syntese
- Robust og specifik cDNA-syntese for en lang række prøvetyper
- En hurtigere revers transkriptasereaktion, der reducerer inkubationstiden fra >50 min til 10 min
- Betydeligt bedre processivitet sammenlignet med SuperScript III RT
- Forenklet trin til fjernelse af genomisk DNA (SuperScript IV-syntesesystem med kun ezDNase)
Enzymkilde
Oprenset fra E. coli ,der udtrykker pol-genet af M-MLV, modificeret for at øge termostabilitet, halveringstid, processivitet og inhibitorresistens og for at reducere RNase H-aktivitet.
Præstation og kvalitetstest
Assays for endodeoxyribonuclease, exodeoxyribonuclease og ribonuclease, samt udbytte og længde af cDNA-produkt
Enhedsdefinition
Én enhed af SuperScript IV RT er mængden af enzym, der kræves for at inkorporere 1 nmol deoxyribonukleotid i syrepræcipiterbart materiale på 10 minutter ved 37°C under anvendelse af poly(A) oligo(dT)12-18 som skabelon/primer.
Enhedsreaktionsbetingelser
50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM MgCl2, 10 mM DTT, 50 mM KCI, 0,5 mM dTTP, 0,4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0,4 mM poly(A) oligo (dT)12-18 og enzym i 20 μl i 10 minutter ved 37°C
Spezifikation
Spezifikation
| Indhold og opbevaring | • Oligo(dT)20, 4 x 50 μl (50 μM) • Tilfældige hexamere, 4 x 250 μl (50 ng/μl) • 5X RT-buffer, 4 x 1 ml • DTT, 4 x 250 μl (0,1 M) • dNTP-mix, 250 μl (10 mM) • SuperScript IV RT, 4 x 50 μl (200 U/μl) • Ribonukleasehæmmer, 4 x 100 μl (40 U/μl) • E. coli RNase H, 4 x 50 μl (2 U/μl) • DEPC-behandlet vand, 4 x 1,2 ml • Total HeLa RNA, 4 x 20 μl (10 ng/μl) • Sense Control Primer, 4 x 25 μl (10 μM) • Antisense Control Primer, 4 x 25 μl (10 μM) Opbevares ved -15 °C til -25 °C. |
| Format | Kit |
| GC-Rich PCR-ydelse | Høj |
| Reaktionshastighed | 10 min. |
| Teknik | Revers transkription |
| Optimal reaktionstemperatur | 50 °C |
| Mængde | Hver |
| Omvendt transkriptase | SuperScript IV |
| Forsendelsestilstand | Tøris |
| Til brug med (applikation) | RT-PCR, Realtids-PCR (qPCR) |
| Mehr anzeigen |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Bitte geben Sie uns Ihr Feedback zu den Produktinhalten, indem Sie das folgende Formular ausfüllen.