Få mere at vide
Invitrogen™ SuperScript™ IV første-strengs syntesesystem
Description
SuperScript IV First-Strand Synthesis System til RT-PCR, tilgængeligt med eller uden ezDNase, er optimeret til syntese af førstestrengs-cDNA fra oprenset poly(A)+ eller total RNA. Systemet inkluderer SuperScript IV Reverse Transcriptase (RT), en proprietær MMLV-mutant, der producerer robust og pålidelig cDNA-syntese i RT-reaktioner. SuperScript IV First-Strand Synthesis System med ezDNase har desuden evnen til at fjerne potentiel genomisk DNA-kontamination.
SuperScript IV-syntesesystemet er væsentligt forbedret i forhold til systemet baseret på SuperScript III med hensyn til inhibitorresistens, processivitet og reaktionshastighed, samtidig med at alle fordelene ved det tidligere system bibeholdes, herunder øget termostabilitet, højeffektiv cDNA-syntese i fuld længde og reduceret RNase-aktivitet. SuperScript IV-systemet er designet til at give pålidelig, konsistent og hurtig cDNA-syntese ved tilstedeværelse af inhibitorer, der findes i en lang række prøver, der får andre aktuelt tilgængelige RT'er til at fungere ineffektivt.
Det ekstremt forenklede genomiske DNA-fjernelsestrin i SuperScript IV First-Strand Synthesis System med ezDNase reducerer dramatisk tiden for hele revers transkriptionsprotokollen og reducerer mulig variation i genekspression på grund af RNA-tab eller beskadigelse under konventionel DNase-behandling. SuperScript IV-syntesesystemet med ezDNase er det bedste valg, hvad angår præstation og fleksibilitet til RT-PCR-applikationer. Vi anbefaler det til alle RT-PCR-applikationer, især når reproducerbarhed og pålidelighed er den primære bekymring, og når inhibitorer i RNA-prøven kan interferere med cDNA-syntese, hvilket fører til bias i genekspressionsundersøgelser.
Begge SuperScript IV First-Strand Synthesis-systemer indeholder alle komponenter, der er nødvendige for RT-reaktioner, plus et ekstra kontrolgen og primere, og giver fleksibilitet til at tilpasse RT-opsætningen, så den passer til behovene for din applikations.
Funktionerne i SuperScript IV First-Strand Synthesis System inkluderer:
- Betydeligt forbedret resistens over for en række forskellige inhibitorer, der kan interferere med cDNA-syntese
- Robust og specifik cDNA-syntese for en lang række prøvetyper
- En hurtigere revers transkriptasereaktion, der reducerer inkubationstiden fra >50 min til 10 min
- Betydeligt bedre processivitet sammenlignet med SuperScript III RT
- Forenklet trin til fjernelse af genomisk DNA (SuperScript IV-syntesesystem med kun ezDNase)
Enzymkilde
Oprenset fra E. coli ,der udtrykker pol-genet af M-MLV, modificeret for at øge termostabilitet, halveringstid, processivitet og inhibitorresistens og for at reducere RNase H-aktivitet.
Præstation og kvalitetstest
Assays for endodeoxyribonuclease, exodeoxyribonuclease og ribonuclease, samt udbytte og længde af cDNA-produkt
Enhedsdefinition
Én enhed af SuperScript IV RT er mængden af enzym, der kræves for at inkorporere 1 nmol deoxyribonukleotid i syrepræcipiterbart materiale på 10 minutter ved 37°C under anvendelse af poly(A) oligo(dT)12-18 som skabelon/primer.
Enhedsreaktionsbetingelser
50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM MgCl2, 10 mM DTT, 50 mM KCI, 0,5 mM dTTP, 0,4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0,4 mM poly(A) oligo (dT)12-18 og enzym i 20 μl i 10 minutter ved 37°C
Specifications
Specifications
| Indhold og opbevaring | • Oligo(dT) 20, 50 μl (50 μM) • Tilfældige hexamere, 250 μl (50 ng/μl) • 5X RT-buffer, 1 ml • DTT, 250 μl (0,1 M) • dNTP mix, 250 μl (10 mM) • SuperScript IV RT, 50 μl (200 U/μl) • Ribonukleasehæmmer, 100 μl (40 U/μl) • E. coli RNase H, 50 μl (2 U/μl) • DEPC-behandlet vand, 1,2 ml • Total HeLa RNA, 20 μl (10 ng/μl) • Sense Control Primer, 25 μl (10 μM) • Antisense Control Primer, 25 μl (10 μM) Opbevares ved -15 °C til -25 °C. |
| Format | Kit |
| GC-Rich PCR-ydelse | Høj |
| Reaktionshastighed | 10 min. |
| Teknik | Revers transkription |
| Optimal reaktionstemperatur | 50 °C |
| Mængde | Hver |
| Omvendt transkriptase | SuperScript IV |
| Forsendelsestilstand | Tøris |
| Til brug med (applikation) | RT-PCR, Realtids-PCR (qPCR) |
| Show More |
Safety and Handling
- SuperScript IV First-Strand Synthesis System
- Advarsel
- Alvorlige øjenskader/øjenirritation Kategori 2
- H319-Forårsager alvorlig øjenirritation.
- P264-Vask grundigt efter brug.
- P280-Bær beskyttelseshandsker/beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse/ ansigtsbeskyttelse.
- P305+P351+P338-VED KONTAKT MED ØJNENE: Skyl forsigtigt med vand i flere minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser, hvis dette kan gøres let. Fortsæt skylning.
- P337+P313-Ved vedvarende øjenirritation: Søg lægehjælp.
- MIXTURE LIST-Indeholder: (R*,R*)-1,4-Dimercapto-2,3-butanediol
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
By clicking Submit, you acknowledge that you may be contacted by Fisher Scientific in regards to the feedback you have provided in this form. We will not share your information for any other purposes. All contact information provided shall also be maintained in accordance with our Privacy Policy.