Invitrogen™ SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA-syntesesæt

SuperScript IV CellsDirect cDNA Synthesis Kit er optimeret til syntese af førstestrengs cDNA direkte fra et pattedyrcellelysat uden først at isolere RNA. Cellelyse og revers transkription udføres i det samme rør, og det resulterende førstestrengs cDNA er klar til brug i PCR og qPCR.

Funktioner i SuperScript IV CellsDirect Syntesesæt
• Kompatibel med en lang række pattedyrcelletyper dyrket under forskellige behandlingsbetingelser
• Enkeltrørsformat minimerer reagenstab, prøvetab og håndteringstid
• Total lysatvolumen kan bruges i førstestrengs cDNA-syntesereaktion, hvilket giver større udbytter med et begrænset antal celler og muliggør påvisning af sjældne transkripter
• Højkvalitets cDNA genereret til brug i en række applikationer, herunder PCR og qPCR
• Simpel protokol tager cirka 37 minutter
• Kompatibel med TaqMan og SYBR Grønne qPCR masterblandinger fra forskellige producenter
• Optimeret ydeevne for 1 10.000 celler pr. prøve, –resultater svarende til dem fra oprenset RNA

Funktioner i SuperScript IV Reverse Transcriptase inkluderet i dette sæt
• Reduceret RNase H aktivitet
• Høj termisk stabilitet
• Høje udbytter af cDNA i førstestrengssyntesereaktionen for større følsomhed og forbedret påvisning af sjældne transkripter
• Overlegen tolerance over for forskellige RT-hæmmere

SuperScript IV revers transkriptase er et topvalg til alle RT-PCR- og qRT-PCR-applikationer. Det er en proprietær MMLV-mutant med overlegen robusthed og pålidelighed i RT-reaktioner. Det er væsentligt forbedret i forhold til SuperScript III revers transkriptase i inhibitorresistens, processivitet og reaktionshastighed, mens det bibeholder alle fordelene ved det tidligere enzym, herunder øget termostabilitet, højeffektiv cDNA-syntese i fuld længde og reduceret RNase-aktivitet.

Sådan virker det
I traditionel RT-PCR isoleres RNA først fra celler i en tidskrævende procedure, der kan føre til tab af materiale. Brug af SuperScript IV CellsDirect cDNA Synthesis Kit, cellerne lyseres, og cDNA'et genereres fra lysatet i et enkelt rør med minimal håndtering og intet prøvetab. DNase I-behandling er et valgfrit trin og kan bruges til at eliminere genomisk DNA før syntese af første streng. Dette kit er blevet optimeret til små celleprøver, der spænder fra 10.000 celler ned til en enkelt celle.