Thermo Scientific™ RiboLock RNase-hæmmer (40 U/μ L)

• Hæmmer ikke eukaryote RNaser T1, T2, U1, U2, CL3 samt prokaryote RNaser I og H
• Fungerer under en lang række reaktionsbetingelser
• Beskytter RNA mod nedbrydning ved temperaturer op til 55°C

Kvalitetskontrol:

• Fraværet af ribonukleaser, endo-, exodeoxyribonukleaser og phosphataser og ribonukleaser bekræftet ved passende kvalitetstests
• Funktionelt testet i RNA- og cDNA-syntese

Kilde:

• E. coli-celler med et klonet gen, der koder for pattedyrs-ribonukleasehæmmer

Molekylvægt:

• 49,6 kDa monomer Definition af aktivitetsenhed:
  • En enhed af RiboLock RNase-hæmmeren hæmmer aktiviteten af 5ng RNase A med 50 %
  • Inhibitoraktivitet analyseres i følgende blanding: 100 mM Tris-HCl (pH 7,5), 1,2 mM EDTA, 0,1 mg/ml BSA, 100 ng/ml RNase A, 0,1 mg/ml [³H]-RNA, 50 mg/ml gær-RNA, 8 mM DTT
• Opbevaringsbuffer:
  • Enzymet leveres i: 20 mM HEPES-NaOH (pH 7,5), 50 mM NaCl, 8 mM DTT, 0,5 mM ELUGENT Detergent og 50 % (v/v) glycerol
• Hæmning og inaktivering
  • Inhibitorer: almindelige denatureringsmidler (SDS, urinstof og alle oxiderende reagenser (p-chlormercuribenzoat, opløst oxygen, ioner i deres højere oxidationstilstande) hæmmer RiboLock RNase-hæmmer kraftigt og frigiver den bundne RNase
  • Inaktiveres ved opvarmning ved 75°C i 10 min. Restaktivitet kan påvises efter 10 min. opvarmning ved 70°

Anbefalet til:

• Hæmning af RNA-nedbrydning i følgende: in vitro-transkription (1), cDNA-syntese (2), in vitro-translation (3), isolering af pattedyrscellefraktioner, der indeholder mRNA-proteinkompleks
• RNA-oprensning og -opbevaring
• Adskillelse og identifikation af specifikke ribonukleaseaktiviteter
• Undersøgelser af tumorundertrykkelse

Bemærk:

• DTT, der findes i opbevaringsbufferen, sikrer stabilitet under langtidsopbevaring, men er ikke nødvendig for inhibitoraktivitet
• Anbefalet koncentration 1u/μl af en reaktionsblanding