Thermo Scientific™ Trypsin, TPCK-behandlet

Thermo Scientific Pierce TPCK Trypsin er en serin-endoprotease, der er anvendelig til aminosyreanalyse og proteinsekventering, kortlægning og strukturelle undersøgelser; den immobiliserede form tillader prøveseparering efter behandling.

Funktioner af Thermo Scientific Pierce TPCK Trypsin
• Spalter på carboxylsiden af arginin- og lysinrester
• Fordøjelsesbetingelser: pH 7,5 9,–0, 37 °C

Trypsin har en bred vifte af anvendelser, herunder aminosyreanalyse og proteinsekventering, kortlægning og strukturelle undersøgelser. Enzymer såsom trypsin og chymotrypsin er blevet vigtige værktøjer i sekventeringsundersøgelser, da de er meget selektive i deres spaltning af peptidbindinger. Trypsin spalter kun de peptidbindinger, hvori carboxylgruppen er bidraget af en lysin- eller en argininrest, uanset længden eller aminosyresekvensen af kæden. Vores immobiliserede TPCK-trypsin kan erstattes af frit trypsin i mange applikationer og er fordelagtigt, fordi det minimerer autolyse, eliminerer kontaminering af en prøve med proteasen og tillader kontrol af fordøjelsen ved at fjerne trypsin. Immobiliseret trypsin er også mere stabilt mod varmeinduceret denaturering, hvilket resulterer i længere vedligeholdelse af aktivitet.

Ansøgninger:
• Fjernelse af klæbende celler fra vævskulturkolber
• Forberedelse af tryptiske fragmenter til Edman-nedbrydningssekventering
• Immobiliseret trypsin kan bruges til at rense sojabønnetrypsinhæmmer
• Brug vores Pierce Trypsin, MS Grade (Cat No. 90057) til massespektrometri workflows Trypsin

er en 23,8 kDa pancreas serin endoprotease afledt af trypsinogen, et inaktivt precursor zymogen, efter enzymatisk fjernelse af en n-terminal ledersekvens med enterokinase. Når først noget trypsin er blevet dannet, kan det katalysere omdannelsen af mere trypsinogen til dets katalytisk aktive form. Trypsin behandles med L-1-tosylamido-2-phenylethylchlormethylketon (TPCK) for at hæmme kontaminerende chymotrypsinaktivitet uden at påvirke trypsinaktiviteten.

Det anbefales at opløse 0,25 g trypsin i 100 mL afkølet HBSS til en 0,25 % w/v opløsning. Bland opløsningen, indtil den er homogen og pH er 7,4 til 7,8. Filtrer opløsningen gennem et lavt proteinbindende filter som f.eks Nalgene™ Rapid-Flow™ Sterile engangsfilterenheder med PES-membraner (kat. nr. 567-0010) og opbevarer -5 C °til -20 °C.

Relaterede produkter
Immobiliseret trypsin, TPCK-behandlet (agaroseharpiks) (kat. nr. 20230)