Thermo Scientific™ 1-Step™ TMB ELISA substratopløsninger

Beskrivelse

TMB (3,3',5,5'-tetramethylbenzidin) er et chromagen, der giver en blå farve, når det oxideres med hydrogenperoxid (katalyseret af HRP) med større absorbanser ved 370 nm og 652 nm. Farven skifter derefter til gul (målt ved 450 nm) ved tilsætning af svovlsyre eller phosphorsyre for at stoppe reaktionen. TMB er meget følsomt og oxideres hurtigere end andre HRP-substrater, hvilket resulterer i hurtigere farveudvikling. I modsætning til andre kommercielt tilgængelige substrater indeholder disse produkter ikke DMF eller DMSO.

Der er tre formuleringer, der primært adskiller sig ved deres følsomhed. Langsom TMB har en mellemliggende følsomhed, ideel til kinetiske aflæsninger. Følsomheden for Turbo TMB kan sammenlignes med følsomheden for OPD, der anvendes ved ca. 1 mg/ml. Ultra TMB-ELISA giver det højeste signal-til-støj-forhold og sensitivitet i picogram-området.

Thermo Scientific Pierce 1-Step TMB ELISA-substrater detekterer peberrodsperoxidase (HRP)-aktivitet, hvilket giver en blå farve (Amax = 370 nm og 652 nm), der skifter til gul (Amax = 450 nm) ved tilsætning af en svovlsyre- eller fosforsyrestopopløsning.

Funktioner ved 1-Step TMB ELISA-substrater:

• Fås i traditionelle eller brugsklare formuleringer
• Ingen yderligere reagenser eller filtrering påkrævet
• Ikke kræftfremkaldende
• Forskellige niveauer af sensitivitet og udviklingshastighed, der passer til enhver analyse
• Ingen DMF eller DMSO i reagenserne

TMB er det mest populære kromogene substrat til HRP-detektion i ELISA og er tilgængelig i flere formater. Pierce 1-Step TMB-substrater er substrater med én komponent, der ikke kræver nogen forberedelse før brug. I modsætning til andre kommercielt tilgængelige substrater indeholder disse produkter ikke DMF eller DMSO.

Thermo Scientific Pierce 1-Step Ultra TMB giver den største følsomhed blandt TMB-substraterne, efterfulgt af 1-Step Turbo TMB og 1-Step Slow TMB. Følsomheden af 1-Step Turbo TMB svarer til OPD-baserede substrater formuleret til ca. 1 mg/ml. 1-Step Slow TMB har mellemfølsomhed — mere følsom end ABTS, men mindre følsom end o-phenylendiamin dihydrochlorid (OPD) eller 1-Step Turbo TMB. 1-Step Slow TMB er et ideelt substrat til kinetiske undersøgelser.

TMB (3,3',5,5'-tetramethylbenzidin) er et kromogen, der giver en blå farve, når det oxideres, typisk som et resultat af oxygenradikaler produceret ved hydrolyse af hydrogenperoxid med HRP. For kinetiske eller ikke-stoppede ELISA-assays har TMB-kromogenet maksimale absorbanser ved 370 nm og 652 nm. Farven skifter derefter til gul ved tilsætning af svovl- eller phosphorsyre med maksimal absorbans ved 450 nm. Et grønt reaktionsprodukt kan være resultatet af delvis omdannelse til det gule produkt fra det blå mellemprodukt. TMB er et meget følsomt ELISA-substrat og oxideres hurtigere end andre HRP-substrater, hvilket resulterer i hurtigere farveudvikling.