Thermo Scientific™ Pierce™ S-Nitrosylation Western Blot Kit og HENS Buffer

S-nitrosylering er en post-translationel modifikation, der regulerer adskillige processer, herunder cellulær proliferation, apoptose, glat muskelafslapning, neurotransmitterfrigivelse og differentiering. Under S-nitrosylering reagerer nitrogenoxidradikaler med cysteinthioler for at producere et S-NO-addukt, der ændrer proteinaktivitet.

Pierce S-Nitrosylation Western Blot Kit
Pierce S-Nitrosylation Western Blot Kit giver de nødvendige reagenser til at udføre en modificeret version af den traditionelle S-nitrosylation switch-analyse, inklusive et cystein-blokerende reagens, reduktionsmiddel, reaktionsbuffer, iodoTMT mærkningsreagens og anti-TMT-antistof. Mærkning udføres ved hjælp af den ikke-biologiske iodoTMT reagens i stedet for HPDP-biotin, hvilket reducerer baggrundssignalet under western blot-detektion. Udover påvisning af S-nitrosylerede proteiner ved western blot, kan en immobiliseret anti-TMT-harpiks bruges til selektivt at berige S-nitrosylerede proteiner/peptider mærket med iodoTMT reagenser. Denne arbejdsgang giver mulighed for kortlægning af S-nitrosyleringssted og multiplekset kvantificering ved hjælp af massespektrometri.

Funktionerne i Pierce S-Nitrosylation Western Blot Kit inkluderer:
•Specifikke —optimerede mærkningsreaktioner skifter S-nitrosocystein efter translationelle modifikationer med iodoTMT reagens til nem påvisning ved western blot ved hjælp af anti-TMT antistof
•Bedre signal-til-støj —bruger en ikke-biologisk iodoTMT reagens til mærkning i stedet for HPDP-biotin, hvilket resulterer i mindre baggrund under western blot-detektion
•Workflow-kompatibel —mærkningsmetode er kompatibel med alternative analysemetoder, herunder berigelse via anti-TMT-harpiks og multipleks kvantificering ved massespektrometri
•Praktisk alle —nødvendige reagenser inkluderet et sæt

HENS Buffer
HENS Buffer består af 100 mM HEPES (pH 7,8), 1 mM EDTA, 0,1 mM Neocuproin og 1 % SDS. Det er en cellelysebuffer beregnet til brug med Pierce S-Nitrosylation Western Blot Kit, som muliggør følsom påvisning af protein S-nitrosocystein post-translationelle modifikationer i et komplet, brugervenligt kit.