Thermo Scientific™ Pierce™ Rekombinant protein A

Bruge Thermo Scientific Pierce Rekombinant Protein A til at sondere og detektere kanin- og humanantistoffer, især IgG-isotyper, i Western blotting, ELISA , IHC og andre immunoassay-protokoller.

Egenskaber ved rekombinant protein A omfatter:

• Indeholder fire Fc-bindende domæner pr. protein
• Bedre end Protein G til polyklonalt IgG fra kanin-, svine-, hunde- og katteserum
• Dårligere end protein G for muse-IgG1, humant IgG3 og rotte-, gede- og ko-antistoffer

Protein A er en cellevægskomponent produceret af flere stammer af Staphylococcus aureus , der består af en enkelt polypeptidkæde og indeholder lidt eller intet kulhydrat. Rekombinant protein A produceres i E. coli og fungerer i det væsentlige på samme måde som naturligt protein A. Protein A-molekylet indeholder fire højaffinitetsbindingssteder, der er i stand til at interagere med Fc-regionen fra IgG fra flere arter, herunder mennesker og kaniner. Optimal binding sker ved pH 8,2, selvom binding også er effektiv ved neutrale eller fysiologiske betingelser (pH 7,0 til 7,6).

Egenskaber af rekombinant protein A

• Kilde: E. coli
• Molekylvægt:∼ 44.600 (tilsyneladende MW af SDS-SIDE: 45.000)
• Form: saltfrit pulver
• A280 af 0,1 % opløsning:∼ 0,165
• Isoelektrisk punkt (pI): 4,7 4,–8

Interaktionen mellem protein A og IgG er ikke ækvivalent for alle arter. Selv inden for en art interagerer Protein A med nogle underklasser af IgG og ikke andre. For eksempel binder humant IgG1, IgG2 og IgG4 stærkt, mens IgG3 ikke binder. Der er også mange tilfælde, hvor monoklonale antistoffer ikke binder til protein A, især størstedelen af rotte-immunoglobuliner og muse-IgG1.