Thermo Scientific™ Pierce™ Proteinkoncentratorer PES, 30K MWCO

For protein og andre biologiske prøver, såsom nukleinsyrer, med en 30K molecular-weight cutoff (MWCO), tilbyder Pierce Protein Concentrators PES hurtig proteinkoncentration, fremragende prøvegenvinding og instrumentkompatibilitet. Disse centrifugalenheder har en højflux polyethersulfon (PES) membran til koncentration, afsaltning og bufferudveksling af biologiske prøver. Dette produkt kan bruges til at behandle prøvevolumener på 0,5 –100 ml.

Funktioner af 30K MWCO Protein Concentrators PES inkluderer:
• Hurtig proteinkoncentration —prøvekoncentration på 10 til 30 gange kan opnås på 15 eller færre minutter
•Fremragende proteingenvinding —typisk proteingenvinding er> 90 % (når prøvemassen er mindst to gange større end den oplyste MWCO)
•Instrumentkompatibilitet Der kan —anvendes en standard mikrocentrifuge med svingende eller fastvinklede (undtagen 88536) rotorer; prøve kan opsamles og genvindes uden omvendt centrifugering
•Alsidig, let —at udføre prøvekoncentration, diafiltrering eller bufferudveksling af biologiske prøver For

nem identifikation er MWCO-værdien ætset på siden af hver enhed. For at hjælpe med prøvetilsætning og -genvinding er der placeret et klart vindue med gradueringer på siden af hver enhed, hvilket muliggør visuel bestemmelse af retentatvolumenet. Membranens lodrette design tillader høje fluxhastigheder, lav ikke-specifik binding og ubetydelig proteinaggregering på membranen, hvilket giver pålidelige og ensartede resultater for behandling af prøvevolumener mellem 0,5 og 100 ml. Typisk proteingenvinding er 90 %, når massen af proteinerne i prøven er mindst to gange større end MWCO for den anvendte enhed. For eksempel, når man koncentrerer IgG (MW∼ 150K) prøver, brug 5K, 10K, 30K eller 50K MWCO koncentratorer. Slutprøvekoncentrationer på 10 til 30 gange kan opnås inden for 15 minutter.

Proteinkoncentratorer PES-applikationer
• Proteinkoncentration af vævskulturmedier, antiserum eller monoklonale antistofpræparater
• Koncentration af proteintoppe efter gelpermeationskromatografi
• Fjernelse af ikke-inkorporeret mærke efter proteinmodifikationsreaktioner
• Koncentration og afsaltning/bufferudveksling efter eluering af protein fra ionbytnings-, hydrofob interaktion (HIC), metalchelat- eller affinitetskromatografisøjler
• Adskillelse af molekyler af forskellig størrelse Pierce Protein Concentrators PES indeholder

en membran, der er klassificeret til at tilbageholde molekyler med en molekylvægt, der er mindst to gange større end MWCO-ratingen for PES-membranen i enheden. Reduceret genvinding kan forekomme ved brug af en koncentrator med molekyler, der er mindre end den anbefalede masse. Proteingenvinding vil variere afhængigt af det specifikke protein i prøven og dets startkoncentration.

Dødstopvolumenet for 0,5 mL, 2 6 mL, –5 20 mL –og 20 100 mL –koncentratorerne er ca.μ L, 30μ L, 50μ L og 350μ L, henholdsvis.

At opnå> 90 % genindvinding af protein med 0,5 ml koncentratorer, skal den minimale proteinprøvekoncentration være 0,05 mg/ml. For alle andre koncentratorer bør den minimale proteinprøvekoncentration være 0,1 mg/ml.

Optimale centrifuger og hastigheder
0,5 mL koncentratorerne kan bruges effektivt ved en maksimal centrifugalkraft på 15.000x g kun ved hjælp af en fast vinkelcentrifuge.

Til 2-6 mL koncentratorerne kan centrifugemodeller med svingende spand eller fastvinklet bruges. Svingende spandcentrifuger, der kan generere 2.000– 4.000x g og en maksimal centrifugalkraft på 4.000x g anbefales. Med fastvinklede centrifuger, modeller i stand til at generere 5.000– 10.000x g og en maksimal centrifugalkraft på 8.000x g anbefales.

Til 5-20 ml volumenkoncentratorer kan centrifugemodeller med svingende spand eller fastvinklet bruges. Svingende spand-centrifuger, der kan generere 2.000– 5.000x g og en maksimal centrifugalkraft på 4.000x g anbefales. Med fastvinklede centrifuger, modeller i stand til at generere 5.000– 8.000x g og en maksimal centrifugalkraft på 6.000x g anbefales.

For 20-100 mL koncentratorerne gælder det kun centrifuger med svingende spand, der er i stand til at generere 1.000– 2.000x g anbefales. Brug en maksimal centrifugalkraft på 2.000x g. Disse koncentratorer anbefales ikke til brug i rotorer med fast vinkel.

Centrifugalkraft, temperatur, prøvevolumen, koncentration og viskositet vil alle påvirke filtreringshastigheden. Centrifugeringstiden bør derfor optimeres for hver applikation.