Thermo Scientific™ Pierce™ Proteinkoncentratorer PES, 10K MWCO, 0,5 –100 ml

Til protein og andre biologiske prøver, såsom nukleinsyrer, med en 10K MWCO, tilbyder Pierce Protein Concentrators PES hurtig proteinkoncentration, fremragende prøvegenvinding og instrumentkompatibilitet. Disse centrifugalenheder har en højflux polyethersulfon (PES) membran til koncentration, afsaltning og bufferudveksling af biologiske prøver. Disse koncentratorer har en MWCO på 10K og kan bruges til at behandle prøvevolumener fra 0,5 til 100 ml.

Funktioner af 10K MWCO Protein Concentrators PES inkluderer:
• Hurtig proteinkoncentration —prøvekoncentration på 10 til 30 gange kan opnås på 10 eller færre minutter ved at bruge 0,5 ml koncentratoren og 15 eller færre minutter ved at bruge de andre mængdekoncentratorer
•Fremragende proteingenvinding —typisk proteingenvinding er> 90 % (når prøvemassen er mindst to gange større end den oplyste MWCO)
•Instrumentkompatibilitet —Der kan anvendes en standard mikrocentrifuge med svingende (undtagen 88513) eller fastvinklede rotorer; prøve kan opsamles og genvindes uden omvendt centrifugering
•Alsidig, —let at udføre prøvekoncentration, diafiltrering eller bufferudveksling af biologiske prøver

For nem identifikation er MWCO-værdien ætset på siden af hver enhed. For at hjælpe med prøvetilsætning og -genvinding er der placeret et klart vindue med gradueringer på siden af hver enhed, hvilket muliggør visuel bestemmelse af retentatvolumenet. Membranens lodrette design tillader høje fluxhastigheder, lav ikke-specifik binding og ubetydelig proteinaggregering på membranen, hvilket giver pålidelige og ensartede resultater for behandling af prøvevolumener mellem 0,5 og 100 ml. Typisk proteingenvinding er 90 %, når massen af proteinerne i prøven er mindst to gange større end MWCO for den anvendte enhed. For eksempel, når man koncentrerer IgG (MW∼ 150 KDa) prøver, brug 3K, 10K, 30K eller 50K MWCO koncentratorer. Slutprøvekoncentrationer på 10 til 30 gange kan opnås inden for 10 minutter ved brug af 0,5 ml koncentratorer og inden for 15 minutter ved brug af andre koncentratorstørrelser.

Proteinkoncentratorer PES-applikationer
• Proteinkoncentration af vævskulturmedier, antiserum eller monoklonale antistofpræparater
• Koncentration af proteintoppe efter gelpermeationskromatografi
• Fjernelse af ikke-inkorporeret mærke efter proteinmodifikationsreaktioner
• Koncentration og afsaltning/bufferbytning efter eluering af protein fra ionbytning
• Adskillelse af molekyler af forskellig størrelse Pierce Protein Concentrators

PES-centrifugalenheder indeholder en membran, der er klassificeret til at tilbageholde molekyler med en molekylvægt, der er mindst to gange større end MWCO-ratingen for PES-membranen i enheden. Reduceret genvinding kan forekomme ved brug af en koncentrator med molekyler, der er mindre end den anbefalede masse. Proteingenvinding vil variere afhængigt af det specifikke protein i prøven og dets startkoncentration.

Dødstopvolumenet for 0,5 mL, 2 6 mL, –5 20 mL –og 20 100 mL –koncentratorerne er ca.μ L, 30μ L, 50μ L og 350μ L, henholdsvis.

At opnå> 90 % genindvinding af protein med 0,5 ml koncentratorer, skal den minimale proteinprøvekoncentration være 0,05 mg/ml. For alle andre koncentratorer bør den minimale proteinprøvekoncentration være 0,1 mg/ml.

Optimale centrifuger og hastigheder
0,5 mL koncentratorerne kan bruges effektivt ved en maksimal centrifugalkraft på 15.000x g, kun ved brug af en centrifuge med fast vinkel.

Til 2-6 mL koncentratorerne kan centrifugemodeller med svingende spand eller fastvinklet bruges. Svingende spandcentrifuger, der kan generere 2.000– 4.000x g og en maksimal centrifugalkraft på 4.000x g anbefales. Med fastvinklede centrifuger, modeller i stand til at generere 5.000– 10.000x g og en maksimal centrifugalkraft på 8.000x g anbefales.

Til 5-20 ml volumenkoncentratorer kan centrifugemodeller med svingende spand eller fastvinklet bruges. Svingende spand-centrifuger, der kan generere 2.000– 5.000x g og en maksimal centrifugalkraft på 4.000x g anbefales. Med fastvinklede centrifuger, modeller i stand til at generere 5.000– 8.000x g og en maksimal centrifugalkraft på 6.000x g anbefales.

For 20-100 mL koncentratorerne gælder det kun centrifuger med svingende spand, der er i stand til at generere 1.000– 2.000x g anbefales. Brug en maksimal centrifugalkraft på 2.000x g for de 20 100 –ml koncentratorer. Koncentratorerne anbefales ikke til brug i fastvinklede rotorer.

Centrifugalkraft, temperatur og prøvevolumen, koncentration og viskositet vil påvirke filtreringshastigheden og kræve optimering af tiden for hver applikation.