Thermo Scientific™ Pierce™ Polyacrylamid afsaltningssøjler, 1,8K MWCO, 5 mL

Pierce 1,8K MWCO polyakrylamid afsaltningssøjler er færdigpakket med porøse polyacrylamidperler og sørger for bufferudveksling og afsaltning af proteiner og andre makromolekylære prøver baseret på en molekylvægt cutoff (MWCO) på 1800. I modsætning til andre størrelsesudelukkende medier er polyacrylamidharpiks ikke udsat for enzymatisk nedbrydning og vil ikke tjene som næringsstof til mikrobiel vækst. Harpiksen er meget hydrofil og minimerer derved uønskede bindingsinteraktioner mellem harpiksen og prøvemolekylerne. Forurening med sukkerarter med lav molekylvægt (som kan forekomme med tværbundet dextranharpiks) er ikke et problem ved brug af polyacrylamidharpiks. Oxidationsmidler kan fjernes uden at ødelægge støtten. Denne harpiks er modtagelig for hydrolyse af amidgrupper under ekstreme pH-forhold, så en drifts-pH på 2-10 anbefales ved stuetemperatur. Polyacrylamidharpiksen kan også autoklaveres ved pH 5,5-6,5 i 30 minutter ved 120 C.°

Disse søjler bruger en harpiks, hvis perler har en våd diameter på 45 til 90μ M, og er ideelle til at adskille peptider og små makromolekyler (større end 1,8 kDa) fra buffersalte og andre forbindelser (mindre end 500 MW).

Funktioner af polyakrylamidharpiks:
• Stabil i vand, saltopløsninger, organiske opløsningsmidler og alkaliske eller sure forhold
• Fremragende flydeegenskaber
• Varmestabile

applikationer:
• Fjernelse af salte fra proteinopløsninger
• Fjernelse af phenol fra nukleinsyrepræparater
• Adskillelse af overskydende tværbinder fra konjugatpræparater
• Fjernelse af overskydende derivatiseringsmidler fra modificerede proteiner
• Fjernelse af uomsat farvestof fra fluorescerende antistoffer
• Fjernelse af fri radiomærkning fra mærkede proteiner
• Udskiftning af en buffer med

en anden Gravity-flow harpiksfiltrering involverer kromatografisk adskillelse af molekyler af forskellige dimensioner baseret på deres relative evner til at trænge ind i en passende stationær fase. En kromatografisk matrix, som sædvanligvis består af meget små, uladede porøse partikler i en vandig opløsning, pakkes i en søjle og anvendes derefter til adskillelsen. Forskellige niveauer af adskillelse kan opnås baseret på porestørrelsen af mediet pakket ind i kolonnen. Mediet kan vælges til helt at udelukke proteiner eller store molekyler, mens det stadig inkluderer små opløste stoffer. Store molekyler udelukkes fra harpiksens indre porer og kommer først ud af søjlen. De mindre molekyler er i stand til at trænge ind i porerne og derefter bevæge sig gennem søjlen med en langsommere hastighed. Disse mindre molekyler skylles efterfølgende gennem søjlen med yderligere buffervolumen.

Afsaltning og bufferudveksling er to af de mest udbredte anvendelser af harpiksfiltreringskromatografi.