Få mere at vide
Thermo Scientific™ Pierce™ Phosphoprotein Phosphate Estimation Assay Kit
Shop alle Thermo Scientific produkterBeskrivelse
Thermo Scientific™ Phosphoprotein Phosphate Estimation Kit muliggør klassificering og identifikation af proteiner som phosphorylerede (serin og threonin), samt semi-kvantitativ vurdering af phosphoryleringsniveauet.
Phosphoprotein Phosphate Estimation Assay Kit er designet til at hjælpe med karakterisering af status og omfang af phosphorylering af rensede proteinprøver. Analysen er baseret på alkalisk hydrolyse af fosfat fra seryl- og threonylrester i fosfoproteiner og kvantificering af det frigivne fosfat med malakitgrønt og ammoniummolybdat. Analysen udføres let i 96-brønds mikroplader eller reagensglas og afsluttes på cirka en time.
Assayet kan bruges til at identificere, om et oprenset protein indeholder enten phospho-serin (p-Ser) eller phospho-threonin (p-Thr) samt til at estimere niveauet af denne type phosphorylering. Til kvantificering sammenlignes testproteinprøven med specifikke koncentrationer af phosvitin, et phosphoprotein med kendt phosphoryleringsniveau. Det alkaliske hydrolysetrin frigiver ikke phosphat fra phospho-tyrosin (p-Tyr)-rester i peptidbinding. Derfor indikerer et negativt resultat for et ukendt oprenset proteinpræparat, at proteinet enten (1) ikke er et phosphoprotein eller (2) er phosphoryleret udelukkende ved tyrosinrester. I sidstnævnte tilfælde vil Western blot-analyse under anvendelse af et anti-phosphotyrosin-antistof være nødvendig for at skelne mellem disse to muligheder.
Højdepunkter:
Bestemt– måler kun phosphoserin (p-Ser) og phosphothreonin (p-Thr); måler ikke phosphotyrosin (p-Tyr)
- Bekvem– reagensglas og 96-brønds mikropladeprotokoller inkluderet og kræver mindre end 90 minutter at udføre
Semi-kvantitativ– beregn mol fosfat (P) pr. mol protein ved hjælp af den inkluderede phosvitinstandard
Kan tilpasses– formatet kan tilpasses til udvikling af specifikke assays for rene phosphoproteiner, når tidligere karakteriserede standarder er tilgængelige
Inkluderer:
Ammoniummolybdatopløsning, malakitgrøn opløsning, tris-bufret saltvandspakke og phopvitin positiv kontrol
Anbefalet til:
Identificer proteiner som indeholdende phosphoserin eller phosphothreonin phosphoryleringer; Estimer mængden af pS- og pT-phosphorylering; Udvikle specifikke kvantitative assays for velkarakteriserede phosphoproteiner af interesse
Tekniske data
Tekniske data
| Indhold og opbevaring | Tilstrækkelig til: 500 røranalyser eller 1920 mikropladeanalyser • Ammoniummolybdatopløsning, 25 ml • Malakitgrøn opløsning, 75 ml • Phosvitin positiv kontrol, 1 mg • TBS Pakning (gør 500 mL), 1 pakning Opbevar komponenterne ved stuetemperatur ved modtagelse. Når det er opløst, opbevares Phosvitin-opløsningen °ved 4 C (°eller -20 C til langtidsopbevaring). |
| Assay | Phosphoprotein Phosphate Estimation Assay |
| Detektionsmetode | Kolorimetrisk |
| Produktlinje | Pierce™ |
| Produkttype | Fosfoproteinfosfatvurdering |
| Specificitet | Ikke målspecifik |
| Tilstrækkelig til | 500 røranalyser eller 1920 mikropladeanalyser |
| Til brug med (applikation) | Opløsningsbaseret detektion, absorption |
| Til brug med (udstyr) | Spektrofotometer, mikropladelæser |
| Mængde | 100 mL |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.