Thermo Scientific™ Pierce™ Peroxidanalysereagens B

Disse vand- og lipidkompatible peroxidtestsæt detekterer peroxider baseret på oxidation af jernholdige til jernsyre-ioner i nærvær af xylenolappelsin. Et testkit har en vandkompatibel formulering, der inkluderer sorbitol, hvilket øger følsomheden. Det andet testkit har en formulering, der kan bruges med lipidholdige prøver uden først at udtrække lipiderne; Men fordi dette sæt ikke indeholder sorbitol, er testen mindre følsom. De fleste proteiner forstyrrer ikke disse analyser, selvom nogle metalkelatorer kan kræve brug af en blank (dvs. kontrol) for at afbøde disse effekter.

I disse analyser omdanner hydroperoxider Fe2+ til Fe3+ ved sur pH. Med den vandkompatible formulering reagerer peroxid først med sorbitol, omdanner det til en peroxylradikal, som igen igangsætter Fe2+-oxidation til Fe3+. I den lipidkompatible formulering omdanner peroxidet Fe2+ direkte til Fe3+. I en svovlsyreopløsning kombineres Fe3+ med xylenol-orange (XO)-farven for at danne et lilla produkt med en absorptionsmaksimum ved 560 nm. Peroxidniveauer i testprøver kan bestemmes ved beregning ud fra den kendte extinktionskoefficient for XO-Fe-komplekset eller ved reference til en standardkurve udarbejdet med brintoverilteopløsning.

Højdepunkter:

• Peroxider – registrerer og måler hydrogenoverilte (H2O2)-niveauer i biologiske og andre væskeprøver
• Bekvemt – er der ingen proprietære reagenser involveret, men de færdige sæt fjerner variationen, vanskeligheden og de ekstra omkostninger ved selv at formulere reagenserne
• Alsidig – kvantificering ved beregning ud fra extinktionskoefficienten eller ved reference til en standardkurve gør det nemt at tilpasse metoden til forskellige prøvetyper og testformål
• To formuleringer – vælger det vandkompatible sæt for maksimal følsomhed med ikke-lipid prøver; vælg det lipidkompatible sæt for bedste resultater med lipidholdige prøver

Anbefalet til:

Generel måling af brintoverilte (H²O²) i proteinprøver; Kvantificering af peroxider i rengøringsmidler; Vurdering af peroxiders effekt på cellulær aktivitet; Bestemmelse af proteinglykation; Måling af peroxidophobning i lipider