Thermo Scientific™ Mitokondrier-isoleringssæt til dyrkede celler

Isolering af mitokondrier er typisk en besværlig proces, der kræver enkeltprøvebehandling med Dounce-homogenisering. Mitochondria Isolation Kit bruger en ikke-mekanisk, reagensbaseret metode, der tillader flere (seks) dyrkede celleprøver at blive behandlet samtidigt på ca. 40 minutter. Dyrkede pattedyrscellepelleter lyseres forsigtigt ved hjælp af en proprietær formulering, der resulterer i maksimalt udbytte af mitokondrier med minimal skade på integriteten. Produktvejledningen beskriver retningslinjer for optimering af renhed vs. udbytteparametre. Sættet tilbyder også en optimeret Dounce-homogeniseringsprocedure, som resulterer i to gange større mitokondrieregenvinding sammenlignet med den reagensbaserede metode. Begge metoder bruger differentiel centrifugering til at adskille mitokondrielle og cytosoliske fraktioner med en benchtop-mikrocentrifuge og afsluttes på cirka 40 minutter (post-cellehøst). Når først de er isoleret, kan mitokondrierne bruges i downstream-applikationer såsom apoptose, signaltransduktion og metaboliske undersøgelser samt til at lette mitokondrielle proteomiske indsatser.

Højdepunkter:

• Hurtig– isolere intakte mitokondrier fra 2x 10 ⁷ celler på cirka 40 minutter (post-cellehøst)

• Fleksibel– behandle flere prøver samtidigt ved hjælp af den reagensbaserede metode, eller opnå højest mulige udbytte med Dounce-homogeniseringsmetoden

• Optimerbar– retningslinjer for optimering af renhed vs. udbytte med den reagensbaserede metode

• Benchtop-let– isolering udført i et mikrocentrifugerør

• Kompatibel– Isolerede mitokondrier kan lyseres med detergent eller behandles til næsten enhver nedstrøms anvendelse, inklusive 2D elektroforese

Inkluderer:

Tre buffer- og detergentopløsninger på i alt ca. 115 ml