Få mere at vide
Beskrivelse
ActivX™ Desthiobiotin-GTP-prober indeholder et modificeret biotin bundet til nukleotidet med en labil acylphosphatbinding. ActivX aktiv-site berigelsesprober er fordelagtige til bestemmelse af aktive enzymniveauer gennem anvendelse af analog-mærkede prober for at tillade profilering af både inaktive og aktive enzymer. De ActivX prober beriger kun selektivt de enzymer, der er funktionelt aktive og biologisk relevante på mærkningstidspunktet. Med selektiv berigelse kan man identificere og profilere målenzymklasser på tværs af prøver eller kan vurdere specificiteten og affiniteten af enzyminhibitorer.
Efter fjernelse af GTP- eller GDP-nukleotider fra enzymer kan desthiobiotin-GTP-proben anvendes til kovalent at modificere konserverede lysinrester i GTPase-nukleotidbindingsstedet. Desthiobiotin-GTP kan selektivt berige, identificere og profilere målenzymklasser i prøver. Præ-inkubation af prøver med småmolekylære inhibitorer, der konkurrerer med prober på det aktive sted, kan bruges til at bestemme inhibitorbindingsaffinitet og målspecificitet. De ActivX Desthiobiotin-GTP-probe mærker kovalent det aktive sted for GTPaser og GTPase-underenheder af G-proteinkoblede receptorer.
Ansøgninger af ActivX Desthiobiotin-GTP-sonde:
•Bred berigelse af GTP-bindende proteiner fra væv, celler og subcellulære proteomer
• Berigelse af enzymer baseret på funktion
• Profilering af snesevis til hundredvis af inhibitor-mål
Vurdering af aktiv-sted-mærkning med desthiobioin-prober kan udføres ved enten Western blot eller massespektrometri (MS). Til Western blot-arbejdsgangen beriges desthiobiotin-mærkede proteiner til SDS-PAGE-analyse og efterfølgende påvisning med specifikke antistoffer. Til MS-arbejdsgangen reduceres desthiobiotin-mærkede proteiner, alkyleres og fordøjes enzymatisk til peptider. Kun de desthiobiotin-mærkede peptider med aktivt sted beriges til analyse med LC-MS/MS. Begge arbejdsgange kan bruges til at bestemme inhibitor-målbinding, men kun MS-arbejdsgangen kan identificere globale inhibitor-mål og off-targets.
Disse produkter er underlagt en etiketlicens med begrænset brug.
Tekniske data
Tekniske data
| Oversigt | ActivX Desthiobiotin-GTP-probe |
| Indhold og opbevaring | Opbevar kl– 80 °C |
| Assay | Proteinkvantificeringsassay |
| Detektionsmetode | Kemiluminescens, massespektrometri, Western Blot |
| Substrattype | GTPase substrat |
| Produktlinje | ActivX |
| Mængde | 16 x 12,9μ g |
| Til brug med (applikation) | Pull-Down |
| Mål | Kinaser (flere), fosfodiesteraser, ATPaser, GTPaser, fosfataser |
| Type | Mærket nukleotidprobe |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.