Få mere at vide
Beskrivelse
De Thermo Scientific™ Pierce Gaussia Luciferase Glow Assay Kit giver et ekstremt lyst og stabilt bioluminescenssignal (halveringstid på mere end 1 time), især i nærværelse af Gaussia-Dura luciferase reporter.
Thermo Scientific Pierce Gaussia Luciferase Glow Assay Kit leverer et følsomt bioluminescenssystem til at bestemme udtrykket af et gen af interesse med en luciferase-reporter. Det ekstremt lyse og stabile bioluminescenssignal (halveringstid over 1 time) produceres i nærvær af Gaussia-Dura luciferase-reporteren på grund af oxidation af luciferasesubstratet coelenterazin (Figur 1). Gaussia luciferase er et 20 kDa-protein fra den marine copepod, Gaussia princeps, som har større proteinstabilitet og signalstyrke end ildflue og den oprindelige Renilla-luciferase. Det bioluminescerende enzym udskilles stærkt i cellekulturmediet, hvilket muliggør levende celleovervågning af rapporteringsaktivitet. Lysudbyttet genereret af luciferasereaktionen kan korreleres med mængden af Gaussia-luciferaseprotein, der produceres og bruges til at bestemme aktiviteten af promotoren, der driver Gaussia-ekspression.
Funktioner ved Gaussia Luciferase Glow Assay Kit:
- Følsom—, meget følsom detektion af Gaussia-luciferaseaktivitet
- Stabil—øget signalstabilitet
- Simple—kræver ikke et luminometer med injektorer
- Kompatible—assay-reagenser kompatible med andre Gaussia-luciferaser
- Automatiseringsvenlige—, modtagelige for højkapacitetsanalyser
- Convenient—indeholder en universel cellelysbuffer og optimeret gløde-assay-reagens
- Safe—gør det muligt at udføre ikke-radioaktive assays
Når det bruges med Thermo Scientific Gaussia-Dura Luc-vektorer, giver sættet et ekstremt følsomt bioluminescerende reporter-assaysystem til detektion af udskilt eller intracellulær luciferaseaktivitet fra promoter- eller signalvejsaktivering med forlænget signalstabilitet. Den lysudstråling, der genereres af luciferasereaktionen (emissionsmaksimum på 485 nm), indikerer, at Gaussia-luciferase blev transskriberet. Denne lysemission kan korreleres med mængden af luciferaseprotein, der produceres, hvilket igen er proportionalt med aktiviteten af promotoren for Gaussia-luciferase-ekspression og indikerer, at den regulatoriske region af målgenet var aktiv. Denne reaktion kræver ikke adenosintrifosfat (ATP) eller andre kofaktorer. Sættet inkluderer cellelysbuffer, reaktionsbuffer og substrat og kan bruges til at detektere aktiviteten af enhver Gaussia-luciferaser eller -derivater, der bruger coelenterazin som substrat.
Gaussia Luciferase Glow Assay Kit kræver:
Gaussia-luciferase og luminometer eller andet instrument, der kan overvåge luminescens, såsom Thermo Scientific Varioskan LUX mikropladeaflæsere.
Anvendelser af Gaussia Luciferase Glow Assay Kit:
- Promotorstudier til analyse af cis-regulatoriske elementer og trans-virkende faktorer
- Narkotikatest
- siRNA- og miRNA-screening
- Multiplexede assays til at studere off-target effekter
- Sekretoriske vej-/proteinlokaliseringsrapporteringsanalyser
- Signaltransduktionsvejsanalyse
- RNA-splejsningsstudier
Gaussia-Dura-genet, der bruges i Thermo Scientific Gaussia-Dura Luc-vektorerne, stammer fra det vilde type Gaussia-gen og leverer lige så klart, men mere stabilt lys. Gaussia Glow Assay Kit-reagensen giver en Gaussia-Dura luciferase-reaktion med gløde-kinetik, der giver et signal med lavere intensitet, men længerevarende varighed, hvilket muliggør højere prøvegennemstrømning. Denne gløde-type analyse med et langvarigt luminescenssignal kræver ikke reagensinjektorer og anbefales til luminometre uden injektorer eller til applikationer, der kræver batchbehandling af prøver.
Tekniske data
Tekniske data
| Type | Assay Kit |
| Mål | Luciferase, Gaussia Luciferase |
| Tilstrækkelig til | 100 Luciferase-assays |
| Mængde | 100 Reaktionssæt |
| Indhold og opbevaring | Tilstrækkeligt til: 100 luciferase-assays i mikropladebrønde • Gaussia Glow Assay Buffer, 5 mL (opbevares ved °4 C) • 100X Coelenterazine, 50μ L (opbevares ved -°80 C) • Luciferase Cell Lysis Buffer (2X), 6 ml (opbevares ved stuetemperatur) Sættet kan opbevares ved -80 °C eller individuelt ved angivne temperaturer. |
| Assay | Reporter Enzyme, Luciferase Reporter Assay |
| Kompatible celler | Pattedyrsceller |
| Detektionsmetode | Bioluminescens |
| Til brug med (udstyr) | Luminometer (mikroplade) |
| Format | 384-brønds plade, 96-brønds plade |
| Vis mere |
Sikkerhed og håndtering
- Pierce Gaussia Luciferase Glow Assay Kit
- Fare
- Akut toksicitet Kategori 3
- Akut toksicitet Kategori 4
- Brandfarlig væske Kategori 2
- Specifik målorgantoksicitet efter enkelt eksponering Kategori 1
- Specifik målorgantoksicitet efter enkelt eksponering Kategori 2
- H225-Meget brandfarlig væske og damp.
- H301-Giftig ved indtagelse.
- H302-Farlig ved indtagelse.
- H311-Giftig ved hudkontakt.
- H319-Forårsager alvorlig øjenirritation.
- H331-Giftig ved indånding.
- H370-Forårsager organskader.
- H371-Kan forårsage organskader.
- P210-Holdes væk fra varme, varme overflader, gnister, åben ild og andre antændelseskilder. Rygning forbudt.
- P260-Indånd ikke pulver/røg/gas/tåge/damp/spray.
- P264-Vask grundigt efter brug.
- P270-Der må ikke spises, drikkes eller ryges under brugen af dette produkt.
- P280-Bær beskyttelseshandsker/beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse/ ansigtsbeskyttelse.
- P301+P310-I TILFÆLDE AF INDTAGELSE: Ring omgående til en GIFTINFORMATION/læge
- P301+P312-I TILFÆLDE AF INDTAGELSE: I tilfælde af ubehag ring til en GIFTINFORMATIO / læge /
- P302+P352-VED KONTAKT MED HUDEN: Vask med rigeligt vand/.
- P308+P313-VED eksponering eller mistanke om eksponering: Søg lægehjælp.
- P330-Skyl munden.
- P370+P378-Ved brand: Anvend til brandslukning.
- P403+P235-Opbevares på et godt ventileret sted. Opbevares køligt.
- P501b-Indholdet/beholderen bortskaffes i henhold til de lokale/regionale/nationale/internationale forskrifter.
- MIXTURE LIST-Contain: methanol
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.