Thermo Scientific™ Pierce™ Fluorescens biotin kvantificeringssæt

Denne mikropladebaserede biotinanalyse er nem at udføre ved at tilføje den medfølgende fluorescerende reporter til de biotinylerede prøver og fortyndede biocytinstandarder. Avidinet fluorescerer, når den svagt interagerende HABA (4'-hydroxyazobenzen-2-carboxylsyre) fortrænges af biotinet. Mængden af biotin bestemmes ved at sammenligne prøvens fluorescens med biocytinstandardkurven. Denne analyse kræver meget mindre prøvevolumen end den kolorimetriske HABA-analyse på mikroplader og er meget mere følsom.

Højdepunkter:

• Hurtig— kræver kun 5 minutters inkubation
• Økonomisk— kræver kun μ10 L prøve (ca. 750 ng biotinyleret IgG)
• Følsom— lineært arbejdsområde på 10 til 60 picomol biotin

Inkluderer:

Assaybuffer, HABA-avidin fluorescerende reporteropløsning og biocytinkontrol

Kræver

Sort uigennemsigtig 96-brønds mikroplade og en fluorescenspladelæser (excitation 494nm; emission 520nm)

Produktdetaljer:

Den meget specifikke interaktion af avidin eller streptavidin med biotin er grundlaget for mange oprensnings- og detektionssystemer. Kvantificering af graden af biotinylering er nødvendig for at vurdere, om en biotin-mærkningsprocedure var vellykket, og hvilken mængde biotinyleret molekyle, der skal bruges til en specifik anvendelse. HABA (4'-hydroxyazobenzen-2-carboxylsyre) er et farvestof, der svagt interagerer med avidin og bruges almindeligvis i et kolorimetrisk assay for hurtigt at estimere biotin-til-protein-forholdet. Fluorescence Biotin Quantitation Kit bruger også HABA farvestof, men er mere følsomt og præcist. En forblanding af fluorescerende avidin med HABA (DyLight Reporter) tilsættes til opløsningen, der indeholder den biotinylerede prøve. På grund af dets højere affinitet for avidin fortrænger biotin HABA'en, hvilket tillader avidin at fluorescere. Mængden af biotin måles i en mikroplade ved at sammenligne fluorescensen med en biocytinstandardkurve. Fluorescensbiotinkvantificeringssættet kræver kun 10 μL prøve. I modsætning hertil kræver den traditionelle kolorimetriske μmetode 100 L prøve, og en anden førende leverandørs fluorescerende analysesæt kræver 50 μL prøve. Vores kit er mere nøjagtigt end den anden leverandørs fluorescerende biotin-assay.