Thermo Scientific™ Pierce™ Biotinyleret proteininteraktion Pull-Down Kit

Sættet gør det muligt at udføre et effektivt pull-down assay med høj proteingenvinding og reproducerbarhed. Denne protokol bruger immobiliseret streptavidin til at indfange et biotinyleret protein og et spinsøjleformat, der muliggør fuldstændig gelretention under hvert indfangnings-, vask- og elueringstrin. Når det biotinylerede lokkemadsprotein er immobiliseret, kan det modstå stringente vaske og forbliver bundet under eluering af byttedyrsprotein, hvilket resulterer i et isoleret bytteprotein uden agnproteinkontamination. Denne teknik er ideel, når der bruges native eller rekombinante proteiner, der ikke udtrykkes med et fusionsmærke. Derudover isoleres bytteprotein fra det immobiliserede lokkemadprotein under anvendelse af native bindingsbetingelser og ikke-denaturerende elueringsbetingelser. Biotinylated Protein Interaction Pull-Down Kit er designet til at lære metoden til førstegangsbrugere og for at øge brugervenlighed og bekvemmelighed for erfarne forskere.

Højdepunkter:

• Biotin pull-down– renser proteininteraktorer for ethvert biotinyleret protein eller biotinmærket ligand

• Komplet sæt– giver alle komponenter og detaljeret protokol til oprensning af protein:protein-interaktioner

• Der er ikke behov for specialudstyr– bruger almindeligt laboratorieudstyr og reagenser (f.eks. mikrocentrifuge)

• Spin kolonne effektivitet– mikrocentrifuge-spin-søjler letter mikrocentrifugespin-søjler, der letter enkel og effektiv manipulation af streptavidin-agaroseperler, herunder enkel behandling af flere prøver

Inkluderer:

Streptavidin agarose harpiks, TBS pakke, biotinblokerende buffer, vaskebuffer, elueringsbuffer, spin-søjler og opsamlingsrør

Anbefalet til:

Opdag et nyt proteininteraktionskompleks ved hjælp af et biotinyleret protein som lokkemad til at fange en formodet bindingspartner fra et cellelysat eller en anden prøve; Bekræft ekspression af et kendt proteininteraktionsmål i et cellelysat; Bestem to oprensede proteiners evne til at interagere (binde) under forskellige bufferbetingelser; Ekstraher protein:proteininteraktionsinformation fra in vitro transkription/translationslysater