Thermo Scientific™ Pierce™ Anti-c-Myc Agarose

Thermo Scientific Pierce Anti-c-Myc Agarose er en højaffinitet immunudfældningsharpiks, der er ideel til rensning af rekombinante c-Myc-mærkede proteiner, der udtrykkes i menneskelige in vitro-ekspressionssystemer samt bakterielle og pattedyrs cellelysater.

Anti-c-Myc-antistoffet, der bruges til at fremstille Pierce Anti-c-Myc Agarose, er et meget specifikt muse IgG1 monoklonalt antistof (klon 9E10), der genkender c-Myc epitope-tagget (EQKLISEEDL), afledt fra det humane c-myc onkogen (p62 c-myc). Støtten er krydsbundet 4% perlebeat agarose. Denne anti-c-Myc affinitetsharpiks kan pakkes i tyngdekraftsrensningskolonner, spin-rensningskolonner eller patroner til FPLC instrumenter til at rense c-Myc-fusionsproteiner, der udtrykkes i bakterie- eller pattedyrsceller.

• Specifikt,  – højt specifikt anti-c-Myc monoklonalt antistof (klon 9E10) muliggør høj udbytte og høj renhed til immunprecipitation
• Skalerbar  – , tilgængelig i 2 og 10 ml resinpakker for at muliggøre større skala rensninger eller immunopræcipitationer
• Versatile  – kan bruges i spin- eller tyngdekraftskolonner samt i FPLC patroner
• Bekvemme  – reagenser til at eluere og detektere c-Myc-mærkede fusionsproteiner fås separat

• Rensning af c-Myc fusionsproteiner udtrykt i Pierce Human In Vitro Translation Kits
• Storskala rensning af rekombinante c-Myc-mærkede proteiner
• Højkapacitetsberigelse af fusionsproteiner og interagerende partnere
• IP og co-IP eksperimenter (som med Pierce c-Myc-Tag IP/co-IP Kit)

Pierce Anti-c-Myc Agarose består af et meget specifikt monoklonalt anti-c-Myc antistof, der er kovalent immobiliseret på en tværbundet 4% perlebelagt agarosestøtte. Produktet leveres som en 25% slurry. Ved inkubation med en prøve fanges c-Myc-mærket fusionsprotein på agaroseperlerne. Efter simple vasketrin kan det mærkede protein let elueres fra harpiksen ved hjælp af 0,1M glycin (pH 2,0-2,8), 3M NaSCN eller 50mM NaOH afhængigt af den efterfølgende anvendelse af det rensede protein. Til eluering af højt funktionelle proteiner kan Pierce c-Myc-peptid også bruges til at eluere det c-Myc-mærkede protein. Anti-c-Myc antistof kan bruges til at påvise tilstedeværelsen af det mærkede protein ved Western blot.

I eksperimenter med et c-Myc-mærket fusionsprotein (26 til 29 kDa) gav harpiksen en bindingskapacitet på 102 til 144 nmol protein pr. ml bundet harpiks. Elutionskapaciteten var mindst 18 til 19 nmol pr. ml bundfældet harpiks ved brug af 0,1 M glycin, pH 2,8. Bindings- og eluationskapacitet vil variere afhængigt af c-Myc-fusionsproteinet og eluationsmetoden.