Invitrogen™ PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt

De PichiaPink™ Secretion Optimization Kit er et nyt rekombinant proteinekspressionssystem baseret på gæren Pichia pastoris . De PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt giver dig bekvem og omkostningseffektiv bioproduktion fra rystekolbe til 1000-liters produktion af dit rekombinante protein. De PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt leveres med vores nye Pichia- stammer, pPINK-HC- og pPINK-LC-vektorerne og sekretionssignalsekvenser til produktion af dit protein.

• Få et komplet sæt til at komme i gang med proteinproduktion i Pichia pastoris .
• Screen dine Pichia- transformanter hurtigt ved hjælp af auxotrofi og farvevalg.
• Reducer proteinnedbrydning med protease-mangelfulde Pichia pastoris- stammer.
• Optimer proteinsekretion med en af 8 sekretionssignalsekvenser.

De PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt leveres med:

• PichiaPink™ Vektorsæt (kat.nr. A11152)
• PichiaPink™ Sekretionssignalsæt (A11155)
• PichiaPink™ Udtryksstammesæt (A11154)
• PichiaPink™ Mediesæt (A11156)

En ny måde at screene Pichia-transformanter på

De PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssættet bruger adenin-auxotrofi til at selektere for Pichia -transformanter. De PichiaPink™ stammer har ade2- genotypen og kræver komplementering med ADE2- genet for at vokse uden adenin. Anvendelse af en auxotrof markør gør det også lettere at vedligeholde transformanter. Der kræves ingen antibiotika for at vedligeholde dine transformanter.

Derudover kan du screene for Pichia -transformanter efter farve. Det uforvandlede PichiaPink™ stammer vises som lyserøde kolonier, mens de transformeres PichiaPink™ stammer vises som hvide kolonier (fig. 1).

Nye udtryksvektorer til Pichia

De PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt leveres med det nye PichiaPink™ Vektor sæt. Sættet indeholder to vektorer, pPINK-LC og pPINK-HC. pPINK-vektorerne er bygget op omkring ADE2- genet til at komplementere de ade2 -deficiente Pichia- stammer. Begge vektorer bruger den methanol-inducerede AOX1- promotor til at udtrykke dit protein. pPINK-LC integreres med lavt kopiantal i Pichia- genomet, mens pPINK-HC-vektoren integreres med højtkopieringsnummer.

Både pPINK-LC og pPINK-HC vektorer er kompatible med PichiaPink™ Sekretionssignalsæt. Ved hjælp af en 3-vejs ligering kan du tilføje en af 8 sekretionssekvenser til dit gen. Bemærk: pPINK-vektorerne udtrykker proteiner intracellulært som standard.

Både PichiaPink™ Vector Kit (Kat. Nr. A11152) og PichiaPink™ Sekretionssignalsæt (A11155) kan bestilles separat for at genopfylde PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt.

Hold dine proteiner intakte

De PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt leveres med PichiaPink™ Udtryksstammesæt. Dette sæt indeholder de 4 Pichia pastoris- stammer til brug med PichiaPink™ Udtrykssystem. Alle 4 stammer har ade2 genotypen. Derudover inkluderer 3 stammer knockouts i 2 proteasegener. Protease-mangelfulde stammer reducerer behovet for proteasehæmmere, når du dyrker dine celler og forbedrer udbyttet af dit protein. Test en enkelt protease knockout eller dobbelt protease knockout for at finde den, der fungerer bedst for dig.

Du kan bestille PichiaPink™ Udtryksstammesæt (kat. nr. A11154) separat til at genopfylde PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt.

Medieposer til at komme i gang

De PichiaPink™ Media Kit er et sæt praktiske færdigpakkede medieposer til brug med PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt. De PichiaPink™ Mediesættet indeholder medier, der er nødvendige for at vokse PichiaPink™ stammer fra frosne lagre til kulturer klar til transformation og udvælgelse. Du kan bestille PichiaPink™ Mediesæt (kat.nr. A11156) separat til at genopfylde PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssæt.

Hvorfor vælge PichiaPink™ Gærekspressionssystem?

De PichiaPink™ Yeast Expression System er baseret på gæren Pichia pastoris . Fordelene ved Pichia pastoris inkluderer hurtig vækst, veldefineret genetisk baggrund, enkel medieformulering og nem håndtering. I over 30 år er Pichia pastoris blevet brugt af laboratorier rundt om i verden til at producere hundredvis af forskellige proteiner fra mange arter, herunder mennesker (Ref 1, 2). De PichiaPink™ Yeast Expression System tillader bekvem og omkostningseffektiv proteinproduktion fra små til store skalaer.

For information om at opnå en kommerciel brugslicens til PichiaPink Yeast ™Expression System, bedes du forhøre dig på outlicensing@lifetech.com.

Referencer

1. Cereghino JL, Cregg JM. Heterolog proteinekspression i den methylotrofiske gær Pichia pastoris. FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66. [PubMed]

2. Cereghino GP , Cereghino JL, Ilgen C, Cregg JM. Produktion af rekombinante proteiner i fermenteringskulturer af gæren Pichia pastoris. Curr Opin Biotechnol. 2002 Aug;13(4):329-32. [PubMed]