Thermo Scientific™ Phusion High-Fidelity PCR Master Mix med HF- eller GC-buffer

Beskrivelse

Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-polymeraser sætter en guldstandard for højtydende PCR. Med en fejlrate, der er 50 gange lavere end den for Taq og 6 gange lavere end den for Pfu, er Phusion High-Fidelity DNA-polymerase et glimrende valg til kloning og andre applikationer, der kræver høj nøjagtighed. Phusion DNA-polymeraser tilbyder robust præstation med korte protokoltider, selv ved tilstedeværelse af PCR-hæmmere, og genererer højere udbytter med lavere enzymmængder end anden DNA-polymerase.

Phusion High-Fidelity PCR Master Mix er en praktisk 2X-blanding indeholdende Phusion DNA-polymerase, nukleotider og optimeret reaktionsbuffer inklusive MgCl₂. To formuleringer af masterblanding er tilgængelige: med HF-buffer (F-531S og F-531L) og med GC-buffer (F-532S og F-532L). Fejlraten for Phusion DNA-polymerase i HF-buffer (4,4 x 10^-7) er lavere end i GC-buffer (9,5 x 10^-7). Derfor bør masterblandingen med HF-buffer bruges som standard mastermix til amplificering med høj nøjagtighed. GC-buffer kan dog forbedre ydeevnen af Phusion DNA Polymerase til nogle vanskelige eller lange skabeloner, såsom GC-rige skabeloner eller dem med komplekse sekundære strukturer.

Højdepunkter

• Høj nøjagtighed (25X Taq)
• Hurtig PCR på grund af korte forlængelsestider (15–30 s/kb)
• Robust præstation, minimal optimering nødvendig

Applikationer

• Amplificering af vanskelige (GC-rige) skabeloner
• PCR med høj nøjagtighed
• Kloning
• Generering af skabeloner til sekventering
• Langtrækkende PCR (op til 20 kb)
• Mutagenese
• Høj gennemstrømnings-PCR

Brug af Phusion DNA-polymeraser
Regler for annealing af Phusion DNA-polymeraser er forskellige fra mange almindelige DNA-polymeraser (såsom Taq-DNA-polymeraser).