Molecular Probes™ pHrodo™ Rød og grøn epidermal vækstfaktor (EGF) og pHrodo™ Røde transferrinkonjugater

Beskrivelse

Opdag internaliseret EGF eller transferrin med meget aktiv, pH-følsom pHrodo Rød og pHrodo Grønne epidermal vækstfaktor (EGF) konjugater og pHrodo Rød transferrin konjugat. Disse konjugater består af pHrodo farvestoffer direkte knyttet til højaktive EGF- eller transferrinmolekyler, som kan bruges i applikationer, herunder HCS, flowcytometri, mikropladefluorometri og HTS til at måle internaliserede EGF- og transferrinmolekyler. De pHrodo Rød og pHrodo Grønne farvestoffer fluorescerer klart, når de udsættes for sure miljøer, såsom dem, der findes i endosomer og lysosomer.

De pHrodo Rød og pHrodo Green Epidermal Growth Factor (EGF) konjugater består af pHrodo Rød eller pHrodo Grønt farvestof direkte konjugeret til et meget aktivt humant rekombinant EGF-molekyle og bruges til påvisning af internaliseret EGF-receptor i celler. Fluorescensmærket EGF har gjort det muligt for forskere at undersøge receptor-membran-interaktioner, studere receptorfordeling, beregne hastighedskonstanter for interaktionen mellem EGF og dens receptor og mere. Fluorescerende mærker, der reagerer på en pH-ændring, tilføjer endnu et niveau af detektion.

pHrodo Rødt transferrinkonjugat består af pHrodo Rødt farvestof direkte konjugeret til et meget aktivt transferrinmolekyle og bruges til påvisning af internaliseret transferrin i celler. Transferrin er et monomert serumglykoprotein (∼ 80.000 daltons), der binder til en specifik receptor på overfladen af hvirveldyrceller og leverer op til to Fe ³⁺ atomer via receptormedieret endocytose. Når først jernbærende transferrinproteiner er inde i endosomer, favoriserer det sure miljø dissociation af jern fra –transferrinreceptorkomplekset. Efter frigivelsen af jern recirkuleres apotransferrinet til plasmamembranen, hvor det frigives fra sin receptor for at opfange mere jern.

Den meget fotostabile pHrodo Rød og pHrodo Grønne farvestoffer er svagt fluorescerende uden for celler ved neutral pH, men når de internaliseres specifikt gennem EGF eller transferrin endocytose, bliver de klart fluorescerende i sure endosomer. Dette muliggør måling af internaliseret EGF eller transferrin, såvel som dynamisk overvågning af EGF eller transferrin internalisering i levende celler.

De pHrodo Rød EGF-konjugat og pHrodo Rødt transferrinkonjugat har excitations-/emissionsspektre på 560/585 nm og kan multiplekses med en lang række blå, røde og langt røde farvestoffer, såsom Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 rød, NucBlue , RFP'er og Mitotracker Deep Red, blandt mange andre. De pHrodo Grønt EGF-konjugat har excitations-/emissionsspektre på 509/533 nm og kan multiplekses med en lang række blå, røde og langt røde farvestoffer, såsom Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 rød, NucBlue , RFP'er og Mitotracker Deep Red, blandt mange andre.

De pHrodo Rød og pHrodo Grønne EGF-konjugater og pHrodo Red Transferrin Conjugate er kompatible i applikationer, herunder traditionel fluorescensmikroskopi, high content screening (HCS), flowcytometri og mikropladebaseret fluorimetri eller high throughput screening (HTS). Konjugaterne er også kompatible med forskellige widefield- eller konfokale fluorescensmikroskoper, flowcytometre, fluorescenspladelæsere og instrumenter med højt indhold.