Molecular Probes™ pHrodo™ Røde og grønne AM Intracellulære pH-indikatorfarvestoffer

Beskrivelse

Mål og kvantificer intracellulær pH med pHrodo Røde og grønne AM-indikatorfarvestoffer, som er fluorogene prober, der krydser cellemembranen og forbliver i det intracellulære rum efter spaltning af uspecifikke esteraser. pHrodo Røde og grønne AM-indikatorfarvestoffer bliver mere og mere fluorescerende, når pH falder og kan bruges til at kvantificere cytosolisk pH i området 4 –9. Disse indikatorfarvestoffer kan også bruges i multipleksforsøg inden for HCS, flowcytometri, mikropladefluorometri og HCS-applikationer.

pHrodo Røde (Kat. Nr. P35372) og Grønne (Kat. Nr. P35373) AM intracellulære pH-indikatorer er fluorogene prober, der bruges til at måle intracellulær pH i levende celler. De er svagt fluorescerende ved neutral pH, men bliver mere og mere fluorescerende, når pH falder. Disse reagenser kan bruges til at kvantificere cellulær cytosolisk pH i området 4 –9 med en pKa på∼ 6,5 og med excitations/emissionsspektre på 560/585 nm (pHrodo rød) eller 509/533 nm (pHrodo Grøn).

Begge pHrodo Rød og pHrodo Grønne pH-indikatorfarvestoffer er fotostabile og egnede til brug i multipleksing-eksperimenter. pHrodo Rød multiplekser nemt med en bred vifte af blå, grønne og langt røde farvestoffer og reportere såsom GFP, Fuo-4, calcein, NucBlue , CellEvent Caspase 3/7 grøn, Mitosox Grøn, og Mitotracker Deep Red, blandt mange andre. pHrodo Grøn multiplekser nemt med en bred vifte af blå, røde og langt røde farvestoffer reportere såsom Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 rød, NucBlue , RFP'er og Mitotracker Deep Red, blandt mange andre.

De pHrodo Røde og grønne farvestoffer er blevet modificeret med AM-estergrupper, hvilket resulterer i et uladet molekyle, der kan gennemtrænge cellemembraner. Når først de er inde i cellen, spaltes de lipofile blokerende grupper af farvestofferne af uspecifikke esteraser, hvilket resulterer i forbindelser, der tilbageholdes i det intracellulære rum. Probens fluorescensintensitet bliver derefter en indikator for intracellulær pH. Efterfølgende brug af det intracellulære pH-kalibreringsbuffersæt (kat.nr. P35379) gør det muligt at kvantificere denne intracellulære pH.

pHrodo Røde og grønne AM intracellulære pH-indikatorfarvestoffer er kompatible med forskellige platforme, såsom traditionel fluorescensmikroskopi, high content screening (HCS), flowcytometri og mikropladebaseret fluorimetri eller high throughput screening (HTS). Disse reagenser er også kompatible med widefield eller konfokal fluorescensmikroskopi, flowcytometri, fluorescenspladelæsere og instrumenter med højt indhold.