Invitrogen™ pHrodo™ Dybrødt pattedyr- og bakteriecellemærkningssæt

De pHrodo iFL Red Microscale Protein Labeling Kit og pHrodo iFL Green Microscale Protein Labeling Kit giver de reagenser, der er nødvendige for nemt at mærke tre mikroskala rensede protein- eller antistofprøver (–20 100μ g) med pHrodo iFL Rød eller pHrodo iFL Grønt farvestof. Disse sæt indeholder amin-reaktive pH-følsomme pHrodo iFL Rødt eller Grønt STP-esterfarvestof, der kovalent binder til frie lysiner hvor som helst de forekommer i et antistof eller protein.

pHrodo iFL Rød og pHrodo iFL Grønne farvestoffer er forbedrede versioner af pHrodo Rød og pHrodo Grønne farvestoffer og optimeret til skabelsen af lyse, opløselige biokonjugater til brug i studiet af antistofinternalisering, endocytose og fagocytose. De er også mere opløselige end originalen pHrodo Rød og pHrodo Grønne farvestoffer, hvilket gør dem nyttige til mærkning af antistoffer, der ellers kan fælde ud af opløsningen under konjugering. pHrodo iFL Rød og pHrodo iFL Grønne farvestoffer er ikke-fluorescerende uden for cellen, men fluorescerer lyserødt eller lysegrønt, da pH-værdien i deres omgivelser bliver mere sur, såsom dem, der findes inde i fagosomer og endosomer.

De pHrodo iFL røde og grønne mikroskalamærkningssæt giver følgende fordele:
• Bekvemmelighedsmærkning —tager typisk to timer med mindre end 30 minutters praktisk tid
•Alsidighedsmærkning —kan udføres på 12 150 kDa –molekylvægtsproteiner
•Tilpasning lav dine egne —prober til at studere antistofinternalisering, fagocytose og endocytose

pHrodo Dybrød pattedyr- og bakteriecellemærkningskit indeholder de reagenser, der er nødvendige for nemt at mærke levende celler (pattedyr eller bakterielle) til undersøgelse af fagocytose og endocytose. Det er optimeret til at skelne mellem fagocyterede og ikke-fagocyterede celler, fordi den pH-følsomme, lave baggrund pHrodo Dybrød farve viser intet signal under neutrale forhold og fluorescerer kun, når det udsættes for sure miljøer. Denne unikke ejendom af pHrodo Deep Red tillader hurtig analyseudvikling og sikkerhed for resultater ved undersøgelse af endocytiske og fagocytiske veje. pHrodo Dybrød farve giver bedre skelnen mellem internaliseret last udefra cellen, fordi den har en omtrentlig pKa på 5 og fluorescerer ikke, før den kommer ind i det sene endosom og lysosom. pHrodo Deep Red farvestof kan påvises ved hjælp af en Cy5 fluorescerende filtersæt og er blevet valideret til brug i en række forskellige applikationer, herunder flowcytometri, fluorescerende mikroskopi og højindholdsanalyse (HCA).

De pHrodo Dybrøde pattedyr- og bakteriecellemærkningssæt tilbyder følgende fordele:
•Multiplexing —pHrodo Deep Red farvestof kan multiplekses med en bred vifte af blå, grønne og røde farvestoffer og reportere såsom GFP og RFP'er, Mitosox Green eller Red, CellEvent Caspase 3/7 grøn eller rød, NucBlue , eller TMR, blandt mange andre
•Enkelhed —let at følge, trin-for-trin protokol
•Overlegen signalvindue, —minimal baggrund ved neutral pH muliggør maksimalt signal-til-støj-forhold for sikkerhed for resultater
•Lav pKa eliminerer —ikke-specifikt signal fra ikke-internaliseret last og fluorescerer kun i sene endosomer og lysosomer