Invitrogen™ pHrodo™ BioParticles™ Konjugater til fagocytose og fagocytosesæt, til flowcytometri

Fluorescensen af pHrodo farvestof stiger dramatisk, når pH falder fra neutral til sur, hvilket gør det til et ideelt værktøj til at studere fagocytose og dens regulering af lægemidler og/eller miljøfaktorer. Uden for cellen er farvestoffet ikke-fluorescerende, hvilket eliminerer behovet for vasketrin og quencher-farvestoffer. Når først det er internaliseret, fluorescerer farvestoffet klart i de sure miljøer af endosomer og lysosomer, hvilket muliggør hurtig analyseudvikling og sikkerhed for resultater ved undersøgelse af fagocytiske veje og deres regulering af lægemidler og/eller miljøfaktorer. Som sådan pHrodo farvestofkonjugater kan bruges i pladelæsere, fluorescensmikroskopi-billeddannelse og flowcytometriapplikationer.

De pHrodo Rød S. aureus BioParticles Konjugat til fagocytose (kat. nr. A10010) giver hurtige og nøjagtige analyseresultater. pHrodo Røde farvestofkonjugater er ikke-fluorescerende uden for cellen, men fluorescerer lyserødt i fagosomer. De pHrodo Rød E. coli BioParticles Konjugat til fagocytose (kat.nr. P35361) detekterer fagocytose og endocytose, tilbyder reduceret signalvariabilitet og forbedret timing i følsomme eksperimenter og kan bruges i multiplex-applikationer med en lang række blå, grønne og langt røde farvestoffer og reportere såsom GFP, Fuo-4, calcein, NucBlue , CellEvent Caspase 3/7 grøn, Mitosox Grøn, og Mitotracker Deep Red, blandt mange andre. De optimale absorptions- og fluorescensemissionsmaksima for pHrodo Rød BioParticles Konjugat er henholdsvis ca. 560/585 nm. Imidlertid er fluoroforen let ophidset med 488-nm argon-ion laser installeret på de fleste flowcytometre.

De pHrodo Rød E. coli BioParticles Fagocytosekit (kat. nr. A10025) til flowcytometri er designet til hurtig og bekvem måling af fagocytisk aktivitet i fuldblodsprøver ved flowcytometri. Sættet indeholder alle de reagenser, der kræves til at vurdere partikelindtagelse og lysering af røde blodlegemer.

pHrodo Deep Red dye er et pH-sensorfarvestof med lav baggrund, der ikke viser noget signal under neutrale forhold og kun fluorescerer i sure miljøer. pHrodo Deep Red farvestof muliggør bedre skelnen mellem internaliseret last udefra cellen, fordi den har en omtrentlig pKa på 5 og ikke fluorescerer, før den kommer ind i det sene endosom og lysosom. pHrodo Deep Red farvestof kan påvises ved hjælp af en Cy5 fluorescerende filtersæt og er blevet valideret til brug i en række forskellige applikationer, herunder flowcytometri, fluorescensmikroskopi, high content analyse (HCA) og high throughput screening (HTS). Det kan også multiplekses med en bred vifte af blå, grønne og røde farvestoffer og reportere såsom GFP og RFP'er, Mitosox Green eller Red, CellEvent Caspase 3/7 grøn eller rød, NucBlue , eller TMR, blandt mange andre.

pHrodo Dyb rød E. coli BioParticles Konjugat til fagocytose (kat.nr. P35360) er et fluorogent reagens uden vask, lav baggrund, udviklet til undersøgelse af fagocytose i et levende cellesystem. Dette konjugat er ikke-fluorescerende uden for cellen, men fluorescerer mørkerødt i fagosomer. Den lave pKa af pHrodo Dyb rød E. coli BioParticles Konjugat eliminerer ikke-specifikt signal fra ikke-internaliseret last og tænder kun i sene endosomer og lysosomer.

De pHrodo Grønne farvestofkonjugater, f.eks pHrodo Rød og pHrodo Deep Red farvestofkonjugater giver hurtigere og mere nøjagtige resultater end nogen anden fagocytoseanalyse. pHrodo Grønne konjugater er ikke-fluorescerende uden for cellen ved neutral pH, men fluorescerer lysegrønt ved sur pH, såsom den af fagosomer. Brug det færdige pHrodo Grøn S. aureus BioParticles Konjugat (kat. nr. P35367) og pHrodo Grøn Zymosan BioParticles Konjugat (kat.nr. P35365) til fagocytose ved billeddannelse, HCA, HTS og flowapplikationer.

Disse pHrodo konjugerede produkter indeholder nok reagens til at udføre 100 tests ved brug af 100μ L i hver brønd på en 96-brønds plade, og de kan multiplekses med en lang række blå, røde og langt røde farvereportere såsom Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 rød, NucBlue , RFP'er og Mitotracker Deep Red, blandt mange andre.

pHrodo Rød Zymosan BioParticles Konjugat (kat. nr. P35364) er også tilgængelig, og pHrodo Grønt farvestof er tilgængeligt som et konjugat af E. coli BioParticles (Kat. nr. P35366).