Invitrogen™ Human AKT (Phospho) [pS473] ELISA Kit

ELISA

The Human AKT (Phospho) [pS473] ELISA Kittet er designet til at detektere og kvantificere niveauet af AKT (Phospho) [pS473] i friske eller frosne humane cellelysater. Assayet genkender både naturligt og rekombinant AKT (Phospho) [pS473]. Metodens princip Et monoklonalt indfangningsantistof specifikt for AKT (Phospho) [pS473] er blevet coatet på brøndene på 96-brøndspladen. Under den første inkubation pipetteres standarder med kendt indhold og ukendte prøver ind i brøndene, og antigenet binder til det immobiliserede (fange) antistof. Efter vask tilsættes et kaninantistof specifikt for målproteinet til brøndene og tjener som detektionsantistof ved at binde til det immobiliserede protein, der fanges under den første inkubation. Efter vask tilsættes en peberrodsperoxidase-mærket anti-kanin IgG. Dette binder til detektionsantistoffet for at fuldende sandwichen med fire medlemmer. Efter en tredje inkubation og vask for at fjerne alt det ubundne enzym, tilsættes en substratopløsning (TMB), som påvirkes af det bundne enzym for at producere farve. Intensiteten af dette farvede produkt er direkte proportional med koncentrationen af målprotein til stede i den originale prøve, og den optiske tæthed kan aflæses på en standard mikropladelæser. Strenge validering Hvert fremstillet parti af dette ELISA kit er kvalitetstestet for kriterier som sensitivitet, specificitet, præcision og lot-to-lot konsistens. Se manualen for mere information om validering.