Invitrogen™ Dynabeads™ Protein A til immunpræcipitation

Dynabeads Protein A-perler er ensartede, 2,8-μ m superparamagnetiske perler med rekombinant protein A (∼ 45 kDa) kovalent koblet til overfladen. Dynabeads Protein A perler er et godt alternativ til Sepharose eller agaroseharpikser til immunpræcipitation (IP) kombineret med dit eget antistof, og både manuelle og automatiserede protokoller er tilgængelige.

Fordele ved Dynabeads Protein A perler inkluderer:
•Hurtig og nem —IP på mindre end 40 minutter uden behov for kolonner, centrifugeringer eller tidskrævende præ-clearing
•Højtydende —højt målproteinudbytte med lavt antistofforbrug
•Lav baggrund meget lav ­—uspecifik binding med et højt signal-til-støj-forhold
• Ensartede perler med høj reproducerbarhed —sikrer de mest ensartede resultater
•Automatiseringsklare automatiseringsprotokoller —tilgængelige med KingFisher prøveoprensningsinstrumenter

Blid adskillelse forårsager minimal fysisk stress for proteiner
Den magnetiske separationsteknologi, der anvendes af Dynabeads Protein A er hurtigt og skånsomt, hvilket forårsager minimal fysisk stress for at målrette proteiner. Dette tillader isolering og koncentration af labile kompositter, som ellers kunne dissociere eller blive beskadiget af proteaser under lange inkubationstider. Nativ proteinkonformation og store proteinkomplekser bevares.

Bindingsstyrke og antistofbindingskapacitet
Dynabeads Protein A-perler muliggør isolering af de fleste pattedyrimmunoglobuliner (Ig). Mængden af opfanget Ig afhænger af koncentrationen af Ig i startprøven og typen og kilden til Ig. 100μ L af Dynabeads Protein A vil isolere cirka –25 30μ g humant IgG fra en prøve indeholdende 20 200–μ g IgG/ml. Overvejende Fc-binding muliggør optimal Ig-orientering.

Dynabeads magnetiske perler er ikke porøse i naturen som f.eks Sepharose eller agaroseharpikser. Således binder antistofferne til den glatte ydre overflade af perlerne og er tilgængelige til at binde til målproteinet. Dette omsættes til et lavt antistofforbrug, mens der opnås et højt udbytte af målproteinet. Den glatte perleoverflade er også årsagen til den lave uspecifikke binding, der Dynabeads magnetiske perler er kendt for. Det rekombinante protein A på perlerne indeholder ikke albuminbindingssteder, således at albumin ikke co-oprenses under proceduren.

Dynabeads immunpræcipitationsprotokol er hurtig og nem
Den manuelle IP-protokol er enkel og kan udføres på mindre end 40 minutter med 3 nemme bind-inkuber-elueringstrin. Proceduren kræver ingen præ-clearing på grund af den lave ikke-specifikke binding og bruger meget lidt antistof, mens den stadig opnår et højt IP-udbytte, hvilket sparer både tid og omkostninger pr. IP.

De antistof-coatede perler kan bruges i en række forskellige IP-applikationer såsom Co-IP, kromatin IP (ChIP/ChIP-sekventering), RNA IP (RIP , RIP sekventering), småskala IgG-oprensning og proteinoprensning. Det isolerede rene målprotein kan bruges i downstream western blot, massespektrometrianalyse, sekventering osv.

Automatisk klar til brug med KingFisher rensesystemer 2.8-
μ m magnetiske perler er ideelle til berigelse med høj kapacitet. Denne proces kan automatiseres ved hjælp af et hvilket som helst af vores

KingFisher prøverensningssystemer Kommerciel forsyning
Vores produktionssteder er ISO 13485-certificeret. Perlernes egenskaber og fremstillingsbetingelser er med til at sikre ensartethed og reproducerbarhed, hvilket gør dem til et ideelt valg til kommerciel levering. Hvis du er i gang med at tilpasse Dynabeads Protein A perler i et kommercielt produkt eller service eller har brug for en større bulkvolumen af dette produkt, kontakt os venligst på oemdynal@lifetech.com eller læs mere på vores Dynabeads OEM informationsside.

Få mere at vide om Dynabeads magnetiske perler og KingFisher prøverensningssystemer:
• Dynabeads Protein A-perler fås også som et 'klar-til-gå'-sæt med buffere inkluderet (kat. nr. 10006D)
• Se vores immunfældningsudvælgelsesskema, data og referencer
• Dynabeads guide til valg af magnetiske perler
• Se magneter for Dynabeads magnetiske perleseparationer
• KingFisher automatiseringsprotokoller
• Se en video om KingFisher Flex-instrumentet

*Sepharose er et varemærke tilhørende GE Healthcare Biovidenskab AB .