Invitrogen™ Digitonin (5 %)

Digitonin, også kendt som digitin, er et mildt, ikke-ionisk detergent med en kolesterollignende struktur, der gør det muligt for det at vandopløselige lipider. Det er nyttigt til at permeabilisere celler og kan bruges som en cytotoksicitetskemi positiv kontrol. Derudover bevarer det det native lipidmiljø i membranproteinkomplekser og kan bruges til at solubilisere membranbundne proteiner. Digitonin har en molekylformel på C ₅₆ H ₉₂ O ₂₉ og en molekylvægt på 1229 Dalton.

Digitonin vaskemiddelopløsning har mange flere anvendelser. Det bruges til at forberede native proteinprøver til analyse på NativePAGE Gel System. Inkluderet i NativePAGE Prøveforberedelseskit (kat. nr. BN2008), denne brugsklare detergentopløsning forbedrer opløseligheden af hydrofobe proteiner og membranproteiner under prøveforberedelse. Prøver fremstillet med 10% DDM, 5% digitonin eller NativePAGE Sample Prep Kit er kompatible med NativePAGE Novex Bis-Tris Geler til naturlig elektroforese og har øget opløsning og reduceret striber. Derudover kan digitonin før strukturel bestemmelse ved kryo-EM eller krystallisation anvendes til at solubilisere membranproteiner (typisk ved –1 2 % vægt/volumen) og som en vaskebuffer.

Det er vigtigt at bemærke til prøveforberedelse, at micellestørrelsen for digitoninvaskemiddel er∼ 70 kDa og bruges typisk i en koncentration, der er 1 –2X den kritiske micellekoncentration (CMC).

Ydermere kan digitonin bruges som en spids i oprenset protein ved CMC-koncentration for at hjælpe med partikelfordeling og foretrukken orientering på gitter under forglasningsprocessen. Derudover giver digitonin effektiv antistofpenetrering i vævssektioner og er kompatibel med immunhistokemi (IHC) farvning. Digitonin i en slutkoncentration på 0,–2 0,5 % i buffer er kompatibel med IHC.

BEMÆRK: Hvis 5% digitonin-opløsningen udfælder ud af opløsningen, opvarmes opløsningen til 37 C °og rystes forsigtigt for at opløse bundfaldet.