Få mere at vide
Invitrogen™ No-Stain™ Proteinmærkningsreagens
Beskrivelse
De Invitrogen No-Stain Protein Labeling Reagent giver en fleksibel, nøjagtig, hurtig og pålidelig metode til at visualisere og normalisere proteiner i en gel eller på en membran (efter-overførsel). Det danner kovalente bindinger til proteiner i geler eller på membraner inden for 10 minutter, kræver ingen affarvningstrin og kan øjeblikkeligt visualiseres ved hjælp af enhver almindeligt tilgængelig imager. No-Stain reagens kræver ingen særlige geler eller andre reagenser og er kompatibel med gelpletter og vestlige arbejdsgange.
Øjeblikkelig visualisering af proteiner i geler
Coomassie og andre gelfarvnings- og affarvningstrin kan være ekstremt tidskrævende og besværlige. No-Stain Proteinmærkningsreagens danner kovalente bindinger med lysinaminosyresidekæderne på alle proteiner i en gel inden for 10 minutter. Da lysin er en af de mest udbredte aminosyrer, No-Stain reagens muliggør påvisning af alle proteiner i en gel eller på en membran, og den stærke signalemission fra det kovalent bundne reagens giver følsomhed på nanogramniveau.
- Alternativ til traditionelle gelfarvningsreagenser —giver mere nøjagtig normalisering over en lang række proteinlysatkoncentrationer (1 80–μ g)
- Følsom —nedre detektionsgrænse på 20 ng pr. bånd
- Specifikke —former binder kun til lysin-sidekæderne af proteiner. Ubundet reagens udsender ikke, hvilket muliggør et overlegent signal-til-støj-forhold
- Fleksibel —uden behov for at skifte dine geler for at få pletfri bekvemmelighed. No-Stain reagens giver pletfri bekvemmelighed med enhver geltype (præfabrikeret eller hæld-din-egen gel)
Opnå guldstandarden for kvantitativ western blotting
Proteinnormalisering er et kritisk trin for at opnå pålidelig og reproducerbar kvantitativ western blotting. Total proteinnormalisering betragtes som guldstandarden for kvantitativ western blotting. Mange førende tidsskrifter har udviklet retningslinjer for indsendelse af western blotting-forskning, og udvalgte citater fra disse retningslinjer er angivet nedenfor.
- ''Til kvantitative sammenligninger bør der anvendes passende reagenser, kontroller og billeddannelsesmetoder med lineære signalområder''–Natur
- 'Registrer, hvordan data blev opnået, om signalintensiteten var lineær med antigenbelastning, og hvordan proteinbelastning blev normaliseret'–Journal of Biological Chemistry
- 'Normaliser signalintensitet til total proteinbelastning (vurderet ved at farve membraner for totalt protein) når det er muligt'–Journal of Biological Chemistry
- 'Husholdende proteiner bør ikke bruges til normalisering uden bevis for, at manipulationer ikke påvirker ekspression'–Journal of Biological Chemistry
En nøjagtig belastningskontrol bør vise et lineært forhold mellem signalintensitet og prøvebelastning under alle eksperimentelle forhold. Signalintensiteten opnået ved mærkning af totale proteiner på en membran med No-Stain reagens sikrer et lineært forhold mellem signalintensitet og prøvebelastning (se figuren nedenfor) under alle eksperimentelle forhold. Derfor er brugen af No-Stain reagens i kvantitative western blot-applikationer muliggør brugen af totalt protein som en ideel ladningskontrol.
- Brugervenlig protokolmærkning af —proteiner inden for 10 minutter på enten nitrocellulose- eller PVDF-membraner
- Hurtig visualisering ved hjælp af en bred vifte af billedapparater med UV- eller fluorescenslyskilder
- Nøjagtig total proteinnormalisering —det brede lineære område for proteindetektion på –1 80μ g muliggør detektering af No-Stain signal sammen med dit målprotein for at opnå nøjagtig total proteinnormalisering
- Følsom og stabil —nanogramniveaufølsomhed med et stabilt signal, der er kompatibelt med nedstrøms immundetekteringstrin
- Overlegne analyse —husholdningsproteiner er modtagelige for signalmætning og andre biologiske variationer, som ikke observeres ved brug No-Stain reagens til total proteinnormalisering
Tekniske data
Tekniske data
| Grønne funktioner | Mindre farligt |
| Produkttype | Proteinmærkningsreagens |
| Indhold og opbevaring | • No-Stain aktivator, 200μ L, opbevares ved -°5 C til -°30 C• No-Stain derivatizer, 200μ L, opbevares ved -°5 C til -°30 C• No-Stain mærkningsbuffer (20X), 2 x 5 ml, opbevares ved 15 C °til 30 °C |
| Oversigt | De No-Stain Proteinmærkningsreagens danner kovalente bindinger med lysinaminosyresidekæderne på alle proteiner |
| Til brug med (udstyr) | Kompatibel med en bred vifte af billedapparater med UV- eller fluorescenslyskilder, f.eks. iBright imager |
| Antal reaktioner | Et standardsæt vil mærke 10 mini-geler eller 10 mini-gel-størrelser |
| Køretid | 10 minutter |
| Forsendelsestilstand | Tøris |
| Detektionsmetode | Fluorescens |
| Gel kompatibilitet | Mini Precast Protein Gels, Midi Precast Protein Gels |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.