Invitrogen™ NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 3 til 12 %, 1,0 mm

Invitrogen NativePAGE Bis-Tris Protein-geler er præfabrikerede polyakrylamid-minigeler, der giver følsom, højopløsningsanalyse af native proteiner og proteinkomplekser til estimering af molekylmasse og vurdering af renhed. De er baseret på den blå native polyacrylamidgelelektroforese (BN PAGE) teknik udviklet af Schägger og von Jagow, som overvinder begrænsningerne ved traditionel native elektroforese ved at give en næsten neutral drifts-pH og detergentkompatibilitet.

Funktioner af NativePAGE Bis-Tris Protein geler omfatter:

• Bredt molekylvægtopløsningsområde på 15 10.000 –kDa
• Neutral-pH-separation , som bedre bevarer den native tilstand af proteinkomplekser
• Opløsning af alle proteiner uanset deres isoelektriske punkt (pI)
• Evne til at analysere membran-proteinkomplekser i deres native konformationer
• Evne til at opnå bedre opløsning end med traditionel tris-glycin-nativ elektroforese

Hvordan NativePAGE Bis-Tris Protein geler virker

I SDS-PAGE fungerer SDS som et ladningsforskydningsmolekyle, der denaturerer proteiner ved at give dem en netto negativ ladning og gør det muligt for proteiner at migrere mod anoden. BN PAGE bruger Coomassie G-250 som ladningsforskydningsmolekylet, som binder til proteiner og giver en netto negativ ladning, mens proteinerne bibeholdes i deres ikke-denaturerede, native tilstand. Den næsten neutrale pH af NativePAGE Bis-Tris Protein-geler giver maksimal stabilitet af både proteinerne og gelmatrixen, hvilket resulterer i en meget følsom metode til analyse af native membran-proteinkomplekser og tilbyder overlegen båndopløsning i forhold til traditionelle Tris-glycin-gelsystemer.

Til overførsel af proteiner til en membran anbefaler vi at bruge NuPAGE overføringsbuffere til traditionelle vådoverførings- og PVDF-membraner. NuPAGE Overførselsbuffere opretholder det neutrale pH-miljø etableret under elektroforese. Nitrocellulosemembraner er ikke kompatible til blotting, da membranen vil binde Coomassie G-250 farve meget tæt. Alternativt kan hurtig halvtør overførsel udføres ved hjælp af Power Blotter (Kat. nr. PB0013) eller hurtig tør overførsel ved hjælp af iBlot 3 Geloverførselsenhed (IB31001) ved hjælp af PVDF-membraner.