Invitrogen™ MultiShot™ StripWell Stbl3™ Kompetente celler

MultiShot StripWell Stbl3 Kemisk kompetente E. coli -celler er kloningskompetente celler designet til kloning af direkte gentagelser fundet i lentivirale ekspressionsvektorer. Stbl3 celler reducerer frekvensen af homolog rekombination og er præ-aliquoteret i et stativ, der indeholder 12 strimler med 8 brønde for at øge produktiviteten for gennemløbsbakterietransformationer.

Opnå bemærkelsesværdig stabilitet af lentivirale vektorer i Stbl3 celler
MultiShot StripWell Stbl3 Kompetente celler reducerer hyppigheden af homolog rekombination af direkte gentagelser fundet i lentivirale vektorer (f.eks. ViraPower Lentiviral ekspressionskit) og andre retrovirale vektorer (f.eks. ustabilitetstilbøjelige HIV-baserede plasmider). De Stbl3 stamme er blevet brugt i mange applikationer, herunder genomredigering af CRISPR-arbejdsgange, vaccineudvikling og kloning og vedligeholdelse af vektorer med flere gentagelser (f.eks. genkodende protein med gentagen sekvens). Transformationseffektiviteten af MultiShot StripWell Stbl3 kemisk kompetente E. coli -celler er> 1 x 10 ⁷ cfu/μ g plasmid DNA.

De Stbl3E. coli- stammen er afledt af HB101-stammen (med et hybrid K-12- og B-stammegenom). Selvom Stbl3 stammen indeholder rec A13-allelen af rec A-mutationen, der reducerer uspecifik rekombinationsforekomst i klonet DNA, evnen til Stbl3 belastning for at opretholde ustabile inserts er angiveligt drevet af andre genetiske egenskaber. Mutationer i Stbl3 methyleringsafhængig restriktionssystem ( mcr B, mrr, og hsd S20) tillader konstruktion af kloning af genomisk DNA. Denne stamme er ende A1+, således er en uspecifik endonuklease I, der fordøjer DNA, til stede i cellerne. Stbl3 giver reproducerbart meget mere plasmid-DNA end DH-stammer (f.eks. 10 gange eller mere plasmid-DNA end TOP10 stamme) og producerer bæredygtigt lentivirus med høj titer.

MultiShot StripWell Stbl3 Kompetente celler tilbyder:
• Forventet effektivitet på> 1 x ¹⁰⁷ transformanter/μ g plasmid DNA
• Optimal ydeevne til udbredelse af lentivirale vektorer og vedligeholdelse af direkte gentagelser
• Forbedret genomisk DNA-kloningskapacitet ( mcr B, mrr og hsd S20)
• Evne til at producere høje DNA-udbytter

Bemærk: For optimal ydeevne opretholdelse af plasmider med komplekse gentagelsessekvenser, Stbl3 celler skal dyrkes ved 30 °C. Ved udførelse af plasmid-DNA-isolering fra Stbl3 celler med vildtype endonuklease I ( ende A1+), sikre, at buffere indeholder 10 mM EDTA. EDTA vil inaktivere endonukleasen og undgå DNA-hak og vektornedbrydning (følg instruktionerne til plasmid-DNA-oprensningskit for ende A1+ E. coli- stammer).

MultiShot StripWell fleksibelt format
Hver StripWell med otte forbundne rør er designet med de samme enkeltrør, engangsfunktioner som vores One Shot-formatrør. Dette format gør det muligt for alle trin i transformationsprotokollen, op til plettering, at finde sted i det samme rør, hvilket sparer tid og reducerer risikoen for kontaminering. Efter tilsætning af DNA, MultiShot StripWell kompetente celler kan transformeres ved varmechok ved 42 °C ved hjælp af et vandbad, alle i samme rør.

StripWell-rørene kan skæres til for at tillade transformationer i et enkelt rør, hvilket eliminerer spildte alikvoter og undgår fryse-optøningscyklusser, der kan resultere i reduceret transformationseffektivitet.

Fordele ved MultiShot StripWell-format inkluderer:
• Øget produktivitet —velegnet til eksperimenter med høj kapacitet
•Maksimal fleksibilitet —transformerer så få som 1 rør eller så mange som 96 fra StripWell-stativet
•Velkendt bekvemmelighed —tilføj DNA direkte til celler, varmechok og genvind i samme rør

Genotype F
^– mcr B mrr hsd S20(r _B , mB–– ) rec A13 sup E44 ara -14 gal K2 lac Y1 pro A2 rps L20(StrR) xyl -5λ–leu mtl -1

Find den stamme og det format, du har brug for
• Andre Stbl-stammer er tilgængelige med forskellig genetisk baggrund.
• Mange andre E. coli- stammer og formater af kemisk kompetente og elektrokompetente celler er også tilgængelige for at opfylde specifikke transformationsbehov.
• For high-throughput transformation, vælg fra vores samling af MultiShot formaterede comp-celler eller e-mail os for tilpassede formateringsmuligheder.
• Vi tilbyder bakterievækstmedier i forskellige formater.