Invitrogen™ MultiShot™ StripWell BL21 Star™ (DE3) Kompetente celler

MultiShot StripWell BL21 Star (DE3) kemisk kompetente E. coli -celler er kloningskompetente celler designet til applikationer, der kræver ekspression på højt niveau af ikke-toksiske rekombinante proteiner fra T7-promotorbaserede ekspressionssystemer med lavt kopiantal. Konstrueret til at bæreλ DE3-lysogen, der indeholder T7 RNA-polymerasegenet under kontrol af lac UV5-promotoren, er disse celler præ-alikvoteret i et stativ, der indeholder 12 strimler med 8 brønde for at øge produktiviteten for gennemløbsbakterietransformationer.

Forbedret ekspression af ikke-toksiske rekombinante proteiner
BL21 (DE3) E. coli -stammen er en af de mest populære værtsstammer til at producere rekombinante proteiner og tilpasset til forskning eller industrielle anvendelser. IPTG er påkrævet for at inducere ekspression af T7 RNA-polymerase-kaskadesystemet, som igen transskriberer det T7-promotorregulerede målgen.

BL21(DE3)-stammen er afledt af E. coli B-stammen, der ikke indeholder lon-proteasen og også er mangelfuld i den ydre membranprotease OmpT. Manglen på to nøgleproteaser reducerer nedbrydning af heterologe proteiner udtrykt i stammerne. Derudover gør flere andre stammeegenskaber dem særligt velegnede til proteinproduktion, nemlig hurtig vækst i minimalt medium, en lavere acetatproduktion, når de dyrkes i medier med højt glucoseindhold, og en evne til at nå høj celletæthed.

MultiShot StripWell BL21 Star (DE3) Kompetente celler tilbyder forbedret mRNA-stabilitet på grund af en mutation i RNaseE-genet ( rne 131), der reducerer niveauer af endogene RNaser og mRNA-nedbrydning og derved øger stabiliteten af mRNA-transkripter og øger proteinudbyttet. De BL21 Star stamme har højere basal ekspression af heterologe gener end BL21 (DE3) stammer på grund af den øgede stabilitet af mRNA. Således stammer som f.eks BL21-AI anbefales til toksisk proteinekspression.

Et skud BL21 Star (DE3) Kemisk kompetent E. coli tilbud:
• Transformationseffektivitet af> 1 x 10 ⁷ cfu/μ g plasmid DNA
• Ion- og OmpT-proteasemangel, der reducerer nedbrydning af rekombinant protein
• Optimeret til brug med lavt kopiantal, T7-promotor-baserede plasmider
•rne 131 mutation, der reducerer niveauer af endogene RNaser og mRNA-nedbrydning
•hsd S-mutation, der muliggør effektiv transformation af umethyleret DNA
• Hurtig vækst i minimalt medium og evne til at nå høj celletæthed

MultiShot StripWell fleksibelt format
Hver StripWell med otte forbundne rør er designet med de samme enkeltrør, engangsfunktioner som vores One Shot-formatrør. Dette format gør det muligt for alle trin i transformationsprotokollen, op til plettering, at finde sted i det samme rør, hvilket sparer tid og reducerer risikoen for kontaminering. Efter tilsætning af DNA, MultiShot StripWell kompetente celler kan transformeres ved varmechok ved 42 C °ved hjælp af et vandbad, alle i samme rør.

StripWell-rørene kan let skæres til for at tillade transformationer i et enkelt rør, hvilket eliminerer spildte alikvoter af celler og undgår fryse-optøning, der kan resultere i reduceret transformationseffektivitet.

Fordele ved MultiShot StripWell-format inkluderer:
• Øget produktivitet —velegnet til eksperimenter med høj kapacitet
•Maksimal fleksibilitet —transformerer så få som 1 rør eller så mange som 96 fra StripWell-stativet
•Velkendt bekvemmelighed —tilføj DNA direkte til celler, varmechok og genvind i samme rør

Genotype F
^– omp T hsd SB (r _B , m^– _B ^–) gal dcm rne 131 (DE3)

Find den belastning og det format, du har brug for
• Vi tilbyder mange E. coli- stammer og formater af kemisk kompetente og elektrokompetente celler til at imødekomme transformationsbehov.
• For high-throughput transformation, vælg fra vores samling af MultiShot formaterede komp-celler.
• Vi tilbyder en række forskellige systemer til ekspression af rekombinante proteiner i E. coli.